西南国防医药
西南國防醫藥
서남국방의약
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN SOUTHWEST CHINA
2014年
9期
929-932
,共4页
张涛%李东%彭晶晶%宋晓峰%李华%杜敏%吴敬波%谭勇%周进军
張濤%李東%彭晶晶%宋曉峰%李華%杜敏%吳敬波%譚勇%週進軍
장도%리동%팽정정%송효봉%리화%두민%오경파%담용%주진군
micoRNA%SDF-1%骨髓间充质干细胞%迁移
micoRNA%SDF-1%骨髓間充質榦細胞%遷移
micoRNA%SDF-1%골수간충질간세포%천이
micoRNA%miR-1%SDF-1%HMSC-bm%migration
目的 明确肿瘤抑制性micro RNA-1(miR-1)能否通过抑制SDF-1的表达和分泌,调控骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)向肿瘤组织的转移.方法 (1)分别利用miR-1表达质粒pSuper-miR-1和miR-1反义寡核苷酸,在肝癌细胞系HepG2中过表达或下调miR-1,Western blot和酶联免疫吸附实验分别检测肝癌细胞蛋白裂解物和培养上清液中SDF-1的表达和分泌水平;(2)构建融合SDF-1 3UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因载体,将其与pSuper-miR-1共转染HEK293细胞,利用双萤光报告基因检测系统检测重组萤光素酶的表达情况.(3)利用pSuper-miR-1或miR-1反义寡核苷酸转染接种于Transwell下层小室的HepG2细胞过表达miR-1或下调miR-1水平,检测TransweH上层小室HMSC-bm向下层小室HepG2肝癌细胞的迁移情况.结果 (1)在肝癌细胞,HepG2过表达miR-1能够显著抑制SDF-1蛋白表达和分泌,而下调miR-1水平则能够诱导SDF-1的表达和分泌.(2) miR-1能够抑制携带SDF-1 3UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因活性.(3)在Transwell下层小室的HepG2细胞中过表达miR-1后,上层小室中HMSC-bm向下层小室迁移细胞数量显著减少,而下调下层小室HepG2细胞中miR-1表达水平,则明显增加HMSC-bm向HepG2肝癌细胞的迁移.结论 miR-1能够直接抑制肝癌细胞SDF-1的表达和分泌,并藉此降低肝癌细胞对HMSC-bm的趋化作用.
目的 明確腫瘤抑製性micro RNA-1(miR-1)能否通過抑製SDF-1的錶達和分泌,調控骨髓間充質榦細胞(HMSC-bm)嚮腫瘤組織的轉移.方法 (1)分彆利用miR-1錶達質粒pSuper-miR-1和miR-1反義寡覈苷痠,在肝癌細胞繫HepG2中過錶達或下調miR-1,Western blot和酶聯免疫吸附實驗分彆檢測肝癌細胞蛋白裂解物和培養上清液中SDF-1的錶達和分泌水平;(2)構建融閤SDF-1 3UTR的pGL3重組螢光素酶報告基因載體,將其與pSuper-miR-1共轉染HEK293細胞,利用雙螢光報告基因檢測繫統檢測重組螢光素酶的錶達情況.(3)利用pSuper-miR-1或miR-1反義寡覈苷痠轉染接種于Transwell下層小室的HepG2細胞過錶達miR-1或下調miR-1水平,檢測TransweH上層小室HMSC-bm嚮下層小室HepG2肝癌細胞的遷移情況.結果 (1)在肝癌細胞,HepG2過錶達miR-1能夠顯著抑製SDF-1蛋白錶達和分泌,而下調miR-1水平則能夠誘導SDF-1的錶達和分泌.(2) miR-1能夠抑製攜帶SDF-1 3UTR的pGL3重組螢光素酶報告基因活性.(3)在Transwell下層小室的HepG2細胞中過錶達miR-1後,上層小室中HMSC-bm嚮下層小室遷移細胞數量顯著減少,而下調下層小室HepG2細胞中miR-1錶達水平,則明顯增加HMSC-bm嚮HepG2肝癌細胞的遷移.結論 miR-1能夠直接抑製肝癌細胞SDF-1的錶達和分泌,併藉此降低肝癌細胞對HMSC-bm的趨化作用.
목적 명학종류억제성micro RNA-1(miR-1)능부통과억제SDF-1적표체화분비,조공골수간충질간세포(HMSC-bm)향종류조직적전이.방법 (1)분별이용miR-1표체질립pSuper-miR-1화miR-1반의과핵감산,재간암세포계HepG2중과표체혹하조miR-1,Western blot화매련면역흡부실험분별검측간암세포단백렬해물화배양상청액중SDF-1적표체화분비수평;(2)구건융합SDF-1 3UTR적pGL3중조형광소매보고기인재체,장기여pSuper-miR-1공전염HEK293세포,이용쌍형광보고기인검측계통검측중조형광소매적표체정황.(3)이용pSuper-miR-1혹miR-1반의과핵감산전염접충우Transwell하층소실적HepG2세포과표체miR-1혹하조miR-1수평,검측TransweH상층소실HMSC-bm향하층소실HepG2간암세포적천이정황.결과 (1)재간암세포,HepG2과표체miR-1능구현저억제SDF-1단백표체화분비,이하조miR-1수평칙능구유도SDF-1적표체화분비.(2) miR-1능구억제휴대SDF-1 3UTR적pGL3중조형광소매보고기인활성.(3)재Transwell하층소실적HepG2세포중과표체miR-1후,상층소실중HMSC-bm향하층소실천이세포수량현저감소,이하조하층소실HepG2세포중miR-1표체수평,칙명현증가HMSC-bm향HepG2간암세포적천이.결론 miR-1능구직접억제간암세포SDF-1적표체화분비,병자차강저간암세포대HMSC-bm적추화작용.
