中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
8期
1406-1411
,共6页
肖海%贺兴波%黄才斌%刘瑶
肖海%賀興波%黃纔斌%劉瑤
초해%하흥파%황재빈%류요
RNA干扰%泛素连接酶%HepG2细胞%细胞增殖%细胞凋亡
RNA榦擾%汎素連接酶%HepG2細胞%細胞增殖%細胞凋亡
RNA간우%범소련접매%HepG2세포%세포증식%세포조망
RNA interference%Ubiquitin ligases%HepG2 cells%Cell proliferation%Apoptosis
目的:探讨shRNA介导的泛素连接酶SIAH2(seven in absentia homolog2)基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响.方法:用已构建的pGenesil-SIAH2重组质粒转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察转染效率.采用RT-PCR和Western blotting技术检测重组质粒对SIAH2 mRNA和蛋白表达的影响,MTS比色法测定重组质粒转染对细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后细胞周期和凋亡的变化.结果:与对照组相比,pGenesil-SIAH2能显著抑制SIAH2 mRNA和蛋白的表达水平;pGenesil-SIAH2转染组细胞增殖速度明显减慢;pGenesil-SIAH2组细胞明显阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高.结论:pGenesil-SIAH2能有效抑制HepG2增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并诱导其早期凋亡.上述研究为以SIAH2为靶点的肝癌基因治疗提供实验依据.
目的:探討shRNA介導的汎素連接酶SIAH2(seven in absentia homolog2)基因錶達抑製對人肝癌細胞株HepG2細胞週期和凋亡的影響.方法:用已構建的pGenesil-SIAH2重組質粒轉染HepG2細胞,熒光顯微鏡下觀察轉染效率.採用RT-PCR和Western blotting技術檢測重組質粒對SIAH2 mRNA和蛋白錶達的影響,MTS比色法測定重組質粒轉染對細胞體外增殖能力的影響,流式細胞術檢測重組質粒轉染後細胞週期和凋亡的變化.結果:與對照組相比,pGenesil-SIAH2能顯著抑製SIAH2 mRNA和蛋白的錶達水平;pGenesil-SIAH2轉染組細胞增殖速度明顯減慢;pGenesil-SIAH2組細胞明顯阻滯于G1期,細胞凋亡率明顯升高.結論:pGenesil-SIAH2能有效抑製HepG2增殖,使細胞週期阻滯在G1期,併誘導其早期凋亡.上述研究為以SIAH2為靶點的肝癌基因治療提供實驗依據.
목적:탐토shRNA개도적범소련접매SIAH2(seven in absentia homolog2)기인표체억제대인간암세포주HepG2세포주기화조망적영향.방법:용이구건적pGenesil-SIAH2중조질립전염HepG2세포,형광현미경하관찰전염효솔.채용RT-PCR화Western blotting기술검측중조질립대SIAH2 mRNA화단백표체적영향,MTS비색법측정중조질립전염대세포체외증식능력적영향,류식세포술검측중조질립전염후세포주기화조망적변화.결과:여대조조상비,pGenesil-SIAH2능현저억제SIAH2 mRNA화단백적표체수평;pGenesil-SIAH2전염조세포증식속도명현감만;pGenesil-SIAH2조세포명현조체우G1기,세포조망솔명현승고.결론:pGenesil-SIAH2능유효억제HepG2증식,사세포주기조체재G1기,병유도기조기조망.상술연구위이SIAH2위파점적간암기인치료제공실험의거.
