草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2014年
4期
847-853
,共7页
蒋晓梅%严海东%张新全%张瑜%黄琳凯
蔣曉梅%嚴海東%張新全%張瑜%黃琳凱
장효매%엄해동%장신전%장유%황림개
鸭茅%实时荧光定量PCR%非生物胁迫%候选内参基因%根组织
鴨茅%實時熒光定量PCR%非生物脅迫%候選內參基因%根組織
압모%실시형광정량PCR%비생물협박%후선내삼기인%근조직
Orchardgrass%qRT-PCR%Abiotic stress%Candidate reference genes%Root tissue
实时荧光定量PCR(qRT PCR)技术已成为研究基因表达的重要技术之一.以鸭茅(Dactylis glomerata)根组织为材料,利用qRT PCR技术检测ACTIN(肌动蛋白酶)、TCTP(翻译控制肿瘤蛋白酶)、UBC(泛素结合酶)、ZTL(ZTL蛋白酶)、GAPDH(甘油醛3磷酸脱氢酶)和SAMDC(腺苷甲硫氨酸脱羧酶)6个候选内参基因在不同非生物胁迫环境下的表达情况,并运用Genorm 3.5,Delta Ct method,NormFinder 0.953,Bestkeeper 1.0和RefFinder软件分析各候选内参基因在鸭茅根组织中的表达稳定性.结果表明:6个候选内参基因综合表达稳定性从高到低排序为ACTIN,TCTP,GAPDH,UBC,ZTL,SAMDC;在干旱胁迫、盐胁迫、涝胁迫、热胁迫与ABA处理条件下,表达稳定性最高的基因是ACTIN;在涝胁迫条件下,表达稳定性最高的基因是TCTP;在不同的胁迫条件下,表达稳定性最低的基因是SAMDC.综合分析可知,基因ACTIN和TCTP最适合作为鸭茅非生物胁迫研究的候选内参基因,这可为鸭茅非生物胁迫下各种基因表达研究奠定基础.
實時熒光定量PCR(qRT PCR)技術已成為研究基因錶達的重要技術之一.以鴨茅(Dactylis glomerata)根組織為材料,利用qRT PCR技術檢測ACTIN(肌動蛋白酶)、TCTP(翻譯控製腫瘤蛋白酶)、UBC(汎素結閤酶)、ZTL(ZTL蛋白酶)、GAPDH(甘油醛3燐痠脫氫酶)和SAMDC(腺苷甲硫氨痠脫羧酶)6箇候選內參基因在不同非生物脅迫環境下的錶達情況,併運用Genorm 3.5,Delta Ct method,NormFinder 0.953,Bestkeeper 1.0和RefFinder軟件分析各候選內參基因在鴨茅根組織中的錶達穩定性.結果錶明:6箇候選內參基因綜閤錶達穩定性從高到低排序為ACTIN,TCTP,GAPDH,UBC,ZTL,SAMDC;在榦旱脅迫、鹽脅迫、澇脅迫、熱脅迫與ABA處理條件下,錶達穩定性最高的基因是ACTIN;在澇脅迫條件下,錶達穩定性最高的基因是TCTP;在不同的脅迫條件下,錶達穩定性最低的基因是SAMDC.綜閤分析可知,基因ACTIN和TCTP最適閤作為鴨茅非生物脅迫研究的候選內參基因,這可為鴨茅非生物脅迫下各種基因錶達研究奠定基礎.
실시형광정량PCR(qRT PCR)기술이성위연구기인표체적중요기술지일.이압모(Dactylis glomerata)근조직위재료,이용qRT PCR기술검측ACTIN(기동단백매)、TCTP(번역공제종류단백매)、UBC(범소결합매)、ZTL(ZTL단백매)、GAPDH(감유철3린산탈경매)화SAMDC(선감갑류안산탈최매)6개후선내삼기인재불동비생물협박배경하적표체정황,병운용Genorm 3.5,Delta Ct method,NormFinder 0.953,Bestkeeper 1.0화RefFinder연건분석각후선내삼기인재압모근조직중적표체은정성.결과표명:6개후선내삼기인종합표체은정성종고도저배서위ACTIN,TCTP,GAPDH,UBC,ZTL,SAMDC;재간한협박、염협박、로협박、열협박여ABA처리조건하,표체은정성최고적기인시ACTIN;재로협박조건하,표체은정성최고적기인시TCTP;재불동적협박조건하,표체은정성최저적기인시SAMDC.종합분석가지,기인ACTIN화TCTP최괄합작위압모비생물협박연구적후선내삼기인,저가위압모비생물협박하각충기인표체연구전정기출.
