中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
7期
524-529
,共6页
姜露%聂佳佳%杨样%羊扬%周明旭%朱国强
薑露%聶佳佳%楊樣%羊颺%週明旭%硃國彊
강로%섭가가%양양%양양%주명욱%주국강
ETEC%hlyA基因%黏附%小鼠感染试验
ETEC%hlyA基因%黏附%小鼠感染試驗
ETEC%hlyA기인%점부%소서감염시험
ETEC%hlyA gene%adherence%mice toxicity experiment
为研究产肠毒素大肠杆菌(ETEC)溶血素hlyA基因的相关生物学特性,本研究通过Red同源重组的方法构建了ETEC标准株K88ac+ C83902和K88ad-C83903的hly基因缺失株.体外生长试验和酵解试验表明:缺失株C83902△hlyA和C83903△hlyA生长速度及生长周期各个阶段的特性与相应野生株相比无差异,其分解发酵糖类和氨基酸的能力也未发生改变.小鼠感染试验显示经野生株和回补株感染的小鼠致死率高,而缺失株不致死,表明hlyA基因可以增强ETEC对ICR小鼠的致病力.从感染小鼠的十二指肠、空肠、回肠分离感染的靶细菌,平板计数和PCR检测表明,ETEC在小鼠回肠的黏附能力强于在十二指肠和空肠,并且基因缺失株黏附能力比野生株显著降低.本研究首次对ETEC溶血素hlyA基因进行研究,为进一步阐释α-溶血素与机体相互作用的分子机制和ETEC的致病机制,以及预防ETEC感染提供了相关的实验依据.
為研究產腸毒素大腸桿菌(ETEC)溶血素hlyA基因的相關生物學特性,本研究通過Red同源重組的方法構建瞭ETEC標準株K88ac+ C83902和K88ad-C83903的hly基因缺失株.體外生長試驗和酵解試驗錶明:缺失株C83902△hlyA和C83903△hlyA生長速度及生長週期各箇階段的特性與相應野生株相比無差異,其分解髮酵糖類和氨基痠的能力也未髮生改變.小鼠感染試驗顯示經野生株和迴補株感染的小鼠緻死率高,而缺失株不緻死,錶明hlyA基因可以增彊ETEC對ICR小鼠的緻病力.從感染小鼠的十二指腸、空腸、迴腸分離感染的靶細菌,平闆計數和PCR檢測錶明,ETEC在小鼠迴腸的黏附能力彊于在十二指腸和空腸,併且基因缺失株黏附能力比野生株顯著降低.本研究首次對ETEC溶血素hlyA基因進行研究,為進一步闡釋α-溶血素與機體相互作用的分子機製和ETEC的緻病機製,以及預防ETEC感染提供瞭相關的實驗依據.
위연구산장독소대장간균(ETEC)용혈소hlyA기인적상관생물학특성,본연구통과Red동원중조적방법구건료ETEC표준주K88ac+ C83902화K88ad-C83903적hly기인결실주.체외생장시험화효해시험표명:결실주C83902△hlyA화C83903△hlyA생장속도급생장주기각개계단적특성여상응야생주상비무차이,기분해발효당류화안기산적능력야미발생개변.소서감염시험현시경야생주화회보주감염적소서치사솔고,이결실주불치사,표명hlyA기인가이증강ETEC대ICR소서적치병력.종감염소서적십이지장、공장、회장분리감염적파세균,평판계수화PCR검측표명,ETEC재소서회장적점부능력강우재십이지장화공장,병차기인결실주점부능력비야생주현저강저.본연구수차대ETEC용혈소hlyA기인진행연구,위진일보천석α-용혈소여궤체상호작용적분자궤제화ETEC적치병궤제,이급예방ETEC감염제공료상관적실험의거.