热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
8期
1528-1532
,共5页
王尉%郭宁%徐明照%田海燕%石胜友
王尉%郭寧%徐明照%田海燕%石勝友
왕위%곽저%서명조%전해연%석성우
水稻%OsPIN1a%蛋白表达%磷酸化
水稻%OsPIN1a%蛋白錶達%燐痠化
수도%OsPIN1a%단백표체%린산화
Rice%OsPIN1a%Protein expression%Phosphorylation
输出载体OsPIN1a是水稻PIN-FORMED(PIN)的家族成员之一,参与调节生长素在植物组织中的不均衡分布.然而,OsPIN1a蛋白的功能结构域如何调节激素的极性运输仍需进一步探讨.本研究拟以日本晴水稻为材料,利用OsPIN1a基因的非编码区设计引物,特异地克隆目的基因,并借助Quickchange XL site-directedmutagenesis技术分别构建单突变[pET30-OsPIN1a(Ser233/Ala)和pET30-OsPIN1a(Ser254/ Ala)]及双突变[pET30-Os PIN1a(Ser233/Ala和Ser254/Ala)]表达载体,通过体外蛋白表达和磷酸化活性分析,明确了OsPIN1a蛋白水解结构域中Ser-233和Ser-254是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PINOID,PID)的磷酸化活性位点,此结果为进一步研究生长素的极性运输机制提供参考.
輸齣載體OsPIN1a是水稻PIN-FORMED(PIN)的傢族成員之一,參與調節生長素在植物組織中的不均衡分佈.然而,OsPIN1a蛋白的功能結構域如何調節激素的極性運輸仍需進一步探討.本研究擬以日本晴水稻為材料,利用OsPIN1a基因的非編碼區設計引物,特異地剋隆目的基因,併藉助Quickchange XL site-directedmutagenesis技術分彆構建單突變[pET30-OsPIN1a(Ser233/Ala)和pET30-OsPIN1a(Ser254/ Ala)]及雙突變[pET30-Os PIN1a(Ser233/Ala和Ser254/Ala)]錶達載體,通過體外蛋白錶達和燐痠化活性分析,明確瞭OsPIN1a蛋白水解結構域中Ser-233和Ser-254是絲氨痠/囌氨痠蛋白激酶(PINOID,PID)的燐痠化活性位點,此結果為進一步研究生長素的極性運輸機製提供參攷.
수출재체OsPIN1a시수도PIN-FORMED(PIN)적가족성원지일,삼여조절생장소재식물조직중적불균형분포.연이,OsPIN1a단백적공능결구역여하조절격소적겁성운수잉수진일보탐토.본연구의이일본청수도위재료,이용OsPIN1a기인적비편마구설계인물,특이지극륭목적기인,병차조Quickchange XL site-directedmutagenesis기술분별구건단돌변[pET30-OsPIN1a(Ser233/Ala)화pET30-OsPIN1a(Ser254/ Ala)]급쌍돌변[pET30-Os PIN1a(Ser233/Ala화Ser254/Ala)]표체재체,통과체외단백표체화린산화활성분석,명학료OsPIN1a단백수해결구역중Ser-233화Ser-254시사안산/소안산단백격매(PINOID,PID)적린산화활성위점,차결과위진일보연구생장소적겁성운수궤제제공삼고.