温州医科大学学报
溫州醫科大學學報
온주의과대학학보
Journal of Wenzhou Medical University
2014年
8期
547-554
,共8页
钟晓芝%段志良%郭江龙%李强%王思娜%李静%林荣%文金生
鐘曉芝%段誌良%郭江龍%李彊%王思娜%李靜%林榮%文金生
종효지%단지량%곽강룡%리강%왕사나%리정%림영%문금생
丙型肝炎病毒%HLA-A*1101%HLA-A*2402%CD8+T细胞%表位
丙型肝炎病毒%HLA-A*1101%HLA-A*2402%CD8+T細胞%錶位
병형간염병독%HLA-A*1101%HLA-A*2402%CD8+T세포%표위
hepatitis C virus%HLA-A*1101%HLA-A*2402%CD8+ T cells%epitope
目的:鉴定出丙型肝炎病毒(HCV)特异性HLA-A*1101限制性和A*2402限制性CD8+T细胞表位.方法:采用T细胞表位预测软件SYFPEITHI预测HCV特异性CD8+T细胞表位,合成HLA-A*1101限制性、A*2402限制性候选表位;建立永生化的HLA-A*1101阳性、A*2402阳性B细胞株,采用竞争性肽结合实验检测候选表位与HLA-A*1101或A*2402分子的结合力;候选表位体外分别刺激HLA-A*1101阳性或A*2402阳性HCV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)后,采用酶联免疫斑点(ELISPOT)和细胞内细胞因子染色(ICS)实验分别检测肽特异性分泌γ-干扰素(IFN-γ)的细胞的水平和(肝) 异性IFN-γ+CD8+T细胞的水平.结果:5条HLA-A*1101限制性候选表位中,NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(VVFSDMETK)与HLA-A*1101分子具有高结合力.3条HLA-A*2402限制性候选表位中,NS3_373 (KCDELASKL)和NS5b_382 (YYLTRDPTI)与HLA-A*2402具有高结合力;在HLA-A*1101阳性HCV感染者PBMCs中存在NS3 609和NS2_165特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞,而在HLA-A*2402阳性HCV感染者PBMCs中存在NS3_373和NS5b 382特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞.结论:本研究证实NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(WFSDMETK)为全新的HCV特异性HLA-A*1101限制性CD8+T细胞表位,NS3_373 (KCDELASKL)和NS5b_382 (YYLTRDPTI)为全新的HCV特异性HLA-A*2402限制性CD8+T细胞表位.
目的:鑒定齣丙型肝炎病毒(HCV)特異性HLA-A*1101限製性和A*2402限製性CD8+T細胞錶位.方法:採用T細胞錶位預測軟件SYFPEITHI預測HCV特異性CD8+T細胞錶位,閤成HLA-A*1101限製性、A*2402限製性候選錶位;建立永生化的HLA-A*1101暘性、A*2402暘性B細胞株,採用競爭性肽結閤實驗檢測候選錶位與HLA-A*1101或A*2402分子的結閤力;候選錶位體外分彆刺激HLA-A*1101暘性或A*2402暘性HCV感染者外週血單箇覈細胞(PBMCs)後,採用酶聯免疫斑點(ELISPOT)和細胞內細胞因子染色(ICS)實驗分彆檢測肽特異性分泌γ-榦擾素(IFN-γ)的細胞的水平和(肝) 異性IFN-γ+CD8+T細胞的水平.結果:5條HLA-A*1101限製性候選錶位中,NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(VVFSDMETK)與HLA-A*1101分子具有高結閤力.3條HLA-A*2402限製性候選錶位中,NS3_373 (KCDELASKL)和NS5b_382 (YYLTRDPTI)與HLA-A*2402具有高結閤力;在HLA-A*1101暘性HCV感染者PBMCs中存在NS3 609和NS2_165特異性分泌IFN-γ的CD8+T細胞,而在HLA-A*2402暘性HCV感染者PBMCs中存在NS3_373和NS5b 382特異性分泌IFN-γ的CD8+T細胞.結論:本研究證實NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(WFSDMETK)為全新的HCV特異性HLA-A*1101限製性CD8+T細胞錶位,NS3_373 (KCDELASKL)和NS5b_382 (YYLTRDPTI)為全新的HCV特異性HLA-A*2402限製性CD8+T細胞錶位.
목적:감정출병형간염병독(HCV)특이성HLA-A*1101한제성화A*2402한제성CD8+T세포표위.방법:채용T세포표위예측연건SYFPEITHI예측HCV특이성CD8+T세포표위,합성HLA-A*1101한제성、A*2402한제성후선표위;건립영생화적HLA-A*1101양성、A*2402양성B세포주,채용경쟁성태결합실험검측후선표위여HLA-A*1101혹A*2402분자적결합력;후선표위체외분별자격HLA-A*1101양성혹A*2402양성HCV감염자외주혈단개핵세포(PBMCs)후,채용매련면역반점(ELISPOT)화세포내세포인자염색(ICS)실험분별검측태특이성분비γ-간우소(IFN-γ)적세포적수평화(간) 이성IFN-γ+CD8+T세포적수평.결과:5조HLA-A*1101한제성후선표위중,NS3_609(ITLTHPITK)화NS2_165(VVFSDMETK)여HLA-A*1101분자구유고결합력.3조HLA-A*2402한제성후선표위중,NS3_373 (KCDELASKL)화NS5b_382 (YYLTRDPTI)여HLA-A*2402구유고결합력;재HLA-A*1101양성HCV감염자PBMCs중존재NS3 609화NS2_165특이성분비IFN-γ적CD8+T세포,이재HLA-A*2402양성HCV감염자PBMCs중존재NS3_373화NS5b 382특이성분비IFN-γ적CD8+T세포.결론:본연구증실NS3_609(ITLTHPITK)화NS2_165(WFSDMETK)위전신적HCV특이성HLA-A*1101한제성CD8+T세포표위,NS3_373 (KCDELASKL)화NS5b_382 (YYLTRDPTI)위전신적HCV특이성HLA-A*2402한제성CD8+T세포표위.
