农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
9期
1166-1174
,共9页
刘建青%孙垚%宁保安%李晓芳%高志贤
劉建青%孫垚%寧保安%李曉芳%高誌賢
류건청%손요%저보안%리효방%고지현
核糖体展示%Anticalin基因文库%胆汁三烯结合蛋白基因(bbp)%脂质运载蛋白%T7启动子
覈糖體展示%Anticalin基因文庫%膽汁三烯結閤蛋白基因(bbp)%脂質運載蛋白%T7啟動子
핵당체전시%Anticalin기인문고%담즙삼희결합단백기인(bbp)%지질운재단백%T7계동자
Ribosome display%Anticalin library%Bilin-binding protein gene (bbp)%Lipocalin%T7 promoter
脂质运载蛋白(lipocalin)是一类广泛存在于生物界的小分子蛋白质家族,具备一些抗体所没有的优点.为了构建库容量大、多样性好的核糖体展示模拟抗体Anticalin文库,本研究以脂质运载蛋白家族之一大菜粉蝶(Pieris brassicae)中提取到的胆汁三烯结合蛋白基因(bilin-binding protein, bbp)(GenBank登录号:X76568.1)为模板,设计了包含16个随机突变位点的引物,采用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)构建bbp基因文库.然后,利用SOE-PCR法引入核糖体展示元件(T片段与P片段),体外构建核糖体展示模拟抗体Anticalin基因文库.结果表明,本研究成功构建了模拟抗体Anticalin基因文库,其库容达到3.76× 1023,文库的可扩增性、完整性及多样性良好,为筛选多种小分子化学残留的模拟抗体提供了基础资料.
脂質運載蛋白(lipocalin)是一類廣汎存在于生物界的小分子蛋白質傢族,具備一些抗體所沒有的優點.為瞭構建庫容量大、多樣性好的覈糖體展示模擬抗體Anticalin文庫,本研究以脂質運載蛋白傢族之一大菜粉蝶(Pieris brassicae)中提取到的膽汁三烯結閤蛋白基因(bilin-binding protein, bbp)(GenBank登錄號:X76568.1)為模闆,設計瞭包含16箇隨機突變位點的引物,採用重疊延伸PCR技術(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)構建bbp基因文庫.然後,利用SOE-PCR法引入覈糖體展示元件(T片段與P片段),體外構建覈糖體展示模擬抗體Anticalin基因文庫.結果錶明,本研究成功構建瞭模擬抗體Anticalin基因文庫,其庫容達到3.76× 1023,文庫的可擴增性、完整性及多樣性良好,為篩選多種小分子化學殘留的模擬抗體提供瞭基礎資料.
지질운재단백(lipocalin)시일류엄범존재우생물계적소분자단백질가족,구비일사항체소몰유적우점.위료구건고용량대、다양성호적핵당체전시모의항체Anticalin문고,본연구이지질운재단백가족지일대채분접(Pieris brassicae)중제취도적담즙삼희결합단백기인(bilin-binding protein, bbp)(GenBank등록호:X76568.1)위모판,설계료포함16개수궤돌변위점적인물,채용중첩연신PCR기술(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)구건bbp기인문고.연후,이용SOE-PCR법인입핵당체전시원건(T편단여P편단),체외구건핵당체전시모의항체Anticalin기인문고.결과표명,본연구성공구건료모의항체Anticalin기인문고,기고용체도3.76× 1023,문고적가확증성、완정성급다양성량호,위사선다충소분자화학잔류적모의항체제공료기출자료.
