农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
9期
1157-1165
,共9页
刘琨%陈松林%张丽燕%董忠典%李海龙%刘万军
劉琨%陳鬆林%張麗燕%董忠典%李海龍%劉萬軍
류곤%진송림%장려연%동충전%리해룡%류만군
半滑舌鳎%甲状腺激素受体β%变态%基因克隆%表达
半滑舌鰨%甲狀腺激素受體β%變態%基因剋隆%錶達
반활설탑%갑상선격소수체β%변태%기인극륭%표체
Cynoglossus semilaevis%Thyroid hormone receptor β%Metamorphosis%Gene cloning%Expression level
甲状腺激素在鲽形目仔鱼的变态过程中起着重要的作用,而甲状腺激素的生物效应是由甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)介导的.本研究利用RACE技术克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)TRβ基因的全长,并对其功能进行了生物信息学分析.结果显示,TRβ基因(GenBank登录号:No.KJ499433) cDNA全长为2 345 bp,开放读框(open reading frame,ORF)长1 188bp,编码396个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别长454和703bp.通过氨基酸序列比对发现,TRβ氨基酸序列铰链区有一段由9个氨基酸残基组成的插入序列,推测这段序列可能为硬骨鱼类TRβ基因所特有的.实时荧光定量PCR技术分析结果显示,TRβ基因在各组织中均有表达,且在肝组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);因此推测TRβ基因在半滑舌鳎成鱼各组织中具有多样性的功能,而且其在肝脏的新陈代谢中起到重要的调节作用.在半滑舌鳎仔鱼变态时,TRβ基因的表达量随变态开始而迅速增加,在变态高峰期到达最高.药物处理实验结果显示,正常变态和提前变态的仔鱼TRβ基因的表达水平均随变态开始而迅速上调,而变态被抑制的仔鱼中TRβ基因的表达量则未出现显著变化,表明TRβ是调控半滑舌鳎仔鱼变态过程的重要基因,在半滑舌鳎生长发育早期阶段起较关键作用.本研究为深入解析半滑舌鳎变态的分子机制提供了理论依据和参考.
甲狀腺激素在鰈形目仔魚的變態過程中起著重要的作用,而甲狀腺激素的生物效應是由甲狀腺激素受體(thyroid hormone receptors,TRs)介導的.本研究利用RACE技術剋隆瞭半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)TRβ基因的全長,併對其功能進行瞭生物信息學分析.結果顯示,TRβ基因(GenBank登錄號:No.KJ499433) cDNA全長為2 345 bp,開放讀框(open reading frame,ORF)長1 188bp,編碼396箇氨基痠,5'-UTR和3'-UTR分彆長454和703bp.通過氨基痠序列比對髮現,TRβ氨基痠序列鉸鏈區有一段由9箇氨基痠殘基組成的插入序列,推測這段序列可能為硬骨魚類TRβ基因所特有的.實時熒光定量PCR技術分析結果顯示,TRβ基因在各組織中均有錶達,且在肝組織中的錶達量顯著高于其他組織(P<0.05);因此推測TRβ基因在半滑舌鰨成魚各組織中具有多樣性的功能,而且其在肝髒的新陳代謝中起到重要的調節作用.在半滑舌鰨仔魚變態時,TRβ基因的錶達量隨變態開始而迅速增加,在變態高峰期到達最高.藥物處理實驗結果顯示,正常變態和提前變態的仔魚TRβ基因的錶達水平均隨變態開始而迅速上調,而變態被抑製的仔魚中TRβ基因的錶達量則未齣現顯著變化,錶明TRβ是調控半滑舌鰨仔魚變態過程的重要基因,在半滑舌鰨生長髮育早期階段起較關鍵作用.本研究為深入解析半滑舌鰨變態的分子機製提供瞭理論依據和參攷.
갑상선격소재접형목자어적변태과정중기착중요적작용,이갑상선격소적생물효응시유갑상선격소수체(thyroid hormone receptors,TRs)개도적.본연구이용RACE기술극륭료반활설탑(Cynoglossus semilaevis)TRβ기인적전장,병대기공능진행료생물신식학분석.결과현시,TRβ기인(GenBank등록호:No.KJ499433) cDNA전장위2 345 bp,개방독광(open reading frame,ORF)장1 188bp,편마396개안기산,5'-UTR화3'-UTR분별장454화703bp.통과안기산서렬비대발현,TRβ안기산서렬교련구유일단유9개안기산잔기조성적삽입서렬,추측저단서렬가능위경골어류TRβ기인소특유적.실시형광정량PCR기술분석결과현시,TRβ기인재각조직중균유표체,차재간조직중적표체량현저고우기타조직(P<0.05);인차추측TRβ기인재반활설탑성어각조직중구유다양성적공능,이차기재간장적신진대사중기도중요적조절작용.재반활설탑자어변태시,TRβ기인적표체량수변태개시이신속증가,재변태고봉기도체최고.약물처리실험결과현시,정상변태화제전변태적자어TRβ기인적표체수평균수변태개시이신속상조,이변태피억제적자어중TRβ기인적표체량칙미출현현저변화,표명TRβ시조공반활설탑자어변태과정적중요기인,재반활설탑생장발육조기계단기교관건작용.본연구위심입해석반활설탑변태적분자궤제제공료이론의거화삼고.