CAJ | 학술논문

成熟卵母细胞的细胞质对供体细胞的重编程有作用,卵母细胞的成熟状态成为核移植过程的关键因素.为了研究卵母细胞体外成熟过程中卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)发生前后脱卵丘细胞对卵母细胞的影响,本研究采用猪(Sus scrofa)卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)于体外培养,每隔5h取卵母细胞采样,置于地衣红染液中染色,根据卵母细胞染色体构型的变化确定卵母细胞的分期,然后在21、27和42 h的卵母细胞进行脱卵丘细胞处理,观察极体数.体外培养不同时间压片观察结果表明,直径2～6 mm卵泡卵母细胞在体外培养时,2～17 h大部分卵母细胞处于GV期(88.30％～52.38％); 22 h有63.25％的卵母细胞处于生发泡破裂至前中期(germinal vesicalbreakdown～premetaphase Ⅰ,GVBD～pre-M Ⅰ);27 h处于中期Ⅰ(metaphase Ⅰ,MⅠ)的卵母细胞最多(42.25％); 32 h处于后期Ⅰ(anaphase Ⅰ,AⅠ)的卵母细胞比例最多(29.90％); 37 h处于末期Ⅰ(telophase Ⅰ,TⅠ)的卵母细胞比例最多(40％);42 h绝大部分卵母细胞达到了中期Ⅱ(metaphaseⅡ,MⅡ)(72.81％).分别采取21、27和44 h的卵母细胞进行脱卵丘细胞处理,发现21h脱卵丘细胞后卵母细胞成熟率为25.56％,低于27 h处理卵的成熟率(34.33％),42 h脱卵丘细胞的卵母细胞的成熟率最高达到84.33％.结果说明,体外卵母细胞成熟过程中,卵丘细胞对卵母细胞的成熟具有重要意义,为进一步探讨和分析猪卵母细胞体外成熟培养的方法,改良体外培养体系,提高猪卵母细胞体外培养成熟率,进而提高胚胎体外培养质量提高奠定基础.
성숙란모세포적세포질대공체세포적중편정유작용,란모세포적성숙상태성위핵이식과정적관건인소.위료연구란모세포체외성숙과정중란모세포생발포파렬(germinal vesicle breakdown,GVBD)발생전후탈란구세포대란모세포적영향,본연구채용저(Sus scrofa)란구-란모세포복합체(cumulus-oocyte complexes,COCs)우체외배양,매격5h취란모세포채양,치우지의홍염액중염색,근거란모세포염색체구형적변화학정란모세포적분기,연후재21、27화42 h적란모세포진행탈란구세포처리,관찰겁체수.체외배양불동시간압편관찰결과표명,직경2～6 mm란포란모세포재체외배양시,2～17 h대부분란모세포처우GV기(88.30％～52.38％); 22 h유63.25％적란모세포처우생발포파렬지전중기(germinal vesicalbreakdown～premetaphase Ⅰ,GVBD～pre-M Ⅰ);27 h처우중기Ⅰ(metaphase Ⅰ,MⅠ)적란모세포최다(42.25％); 32 h처우후기Ⅰ(anaphase Ⅰ,AⅠ)적란모세포비례최다(29.90％); 37 h처우말기Ⅰ(telophase Ⅰ,TⅠ)적란모세포비례최다(40％);42 h절대부분란모세포체도료중기Ⅱ(metaphaseⅡ,MⅡ)(72.81％).분별채취21、27화44 h적란모세포진행탈란구세포처리,발현21h탈란구세포후란모세포성숙솔위25.56％,저우27 h처리란적성숙솔(34.33％),42 h탈란구세포적란모세포적성숙솔최고체도84.33％.결과설명,체외란모세포성숙과정중,란구세포대란모세포적성숙구유중요의의,위진일보탐토화분석저란모세포체외성숙배양적방법,개량체외배양체계,제고저란모세포체외배양성숙솔,진이제고배태체외배양질량제고전정기출.