农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
9期
1065-1073
,共9页
段安琴%王宁%于童%王华岩
段安琴%王寧%于童%王華巖
단안금%왕저%우동%왕화암
猪%成纤维细胞%四环素调控基因(TetO)诱导系统%慢病毒%重编程
豬%成纖維細胞%四環素調控基因(TetO)誘導繫統%慢病毒%重編程
저%성섬유세포%사배소조공기인(TetO)유도계통%만병독%중편정
Sus scrofa domesticus%Fibroblasts%Tetracycline operator(TetO)-induced system%Lentiviral%Reprogramming
建立含有TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA的第二代猪(Sus scrofa domesticus)成纤维细胞,使其在添加强力霉素(doxycycline,DOX)而无需再次感染病毒的条件下可以重编程.将慢病毒(Lentiviral)质粒四环素调控基因(TetO)-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA同时感染猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF),在添加DOX的培养条件下,形成诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs).随后,将iPSCs通过形成拟胚体(embryoid body,EB)再分化为成纤维样细胞,即TetO-PEF细胞.TetO-PEF携带TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA两个载体,且外源四因子拷贝数一致,在±DOX条件下调控四因子表达,直接驱动细胞重编程.本研究建立了TetO-PEF细胞系,为优化猪iPSCs培养条件提供了新的细胞资源.
建立含有TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA的第二代豬(Sus scrofa domesticus)成纖維細胞,使其在添加彊力黴素(doxycycline,DOX)而無需再次感染病毒的條件下可以重編程.將慢病毒(Lentiviral)質粒四環素調控基因(TetO)-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA同時感染豬胎兒成纖維細胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF),在添加DOX的培養條件下,形成誘導多能榦細胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs).隨後,將iPSCs通過形成擬胚體(embryoid body,EB)再分化為成纖維樣細胞,即TetO-PEF細胞.TetO-PEF攜帶TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA兩箇載體,且外源四因子拷貝數一緻,在±DOX條件下調控四因子錶達,直接驅動細胞重編程.本研究建立瞭TetO-PEF細胞繫,為優化豬iPSCs培養條件提供瞭新的細胞資源.
건립함유TetO-FUW-OSKM화FUW-M2rtTA적제이대저(Sus scrofa domesticus)성섬유세포,사기재첨가강력매소(doxycycline,DOX)이무수재차감염병독적조건하가이중편정.장만병독(Lentiviral)질립사배소조공기인(TetO)-FUW-OSKM화FUW-M2rtTA동시감염저태인성섬유세포(porcine embryonic fibroblasts,PEF),재첨가DOX적배양조건하,형성유도다능간세포(induced pluripotent stem cells,iPSCs).수후,장iPSCs통과형성의배체(embryoid body,EB)재분화위성섬유양세포,즉TetO-PEF세포.TetO-PEF휴대TetO-FUW-OSKM화FUW-M2rtTA량개재체,차외원사인자고패수일치,재±DOX조건하조공사인자표체,직접구동세포중편정.본연구건립료TetO-PEF세포계,위우화저iPSCs배양조건제공료신적세포자원.
