安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2014年
10期
1841-1843
,共3页
陈泽文%石开虎%陶辉%吴君旭%徐盛松%宣海洋%曹炜%沙纪名%占红英
陳澤文%石開虎%陶輝%吳君旭%徐盛鬆%宣海洋%曹煒%沙紀名%佔紅英
진택문%석개호%도휘%오군욱%서성송%선해양%조위%사기명%점홍영
心肌纤维化%转化生长因-β1%α平滑肌肌动蛋白%DNA甲基化转移酶3A
心肌纖維化%轉化生長因-β1%α平滑肌肌動蛋白%DNA甲基化轉移酶3A
심기섬유화%전화생장인-β1%α평활기기동단백%DNA갑기화전이매3A
cardiac fibrosis%TGF-β1%α-SMA%DNMT3A
目的：探讨转化生长因-β1（TGF-β1）刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A （DNMT3A）的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死，取大鼠心肌组织，以组织块酶消化法分离细胞，通过差速贴壁离心法收集、培养大鼠心肌成纤维细胞。模型组的心肌成纤维细胞分别给予TGF-β11、5、10μg · L-1，建立体外心肌成纤维细胞活化模型。MTT法检测细胞增殖活性，酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清液胶原含量，Western blot法检测DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达。结果与正常对照组相比较，模型组TGF-β1刺激细胞12、24、48 h后，血清中I型胶原和III型胶原的含量明显增高，细胞增殖活性明显增强，Western blot检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组。结论心肌纤维化的形成可能与DNMT3A表达上调有关，潜在的分子作用机制有待于进一步研究。
目的：探討轉化生長因-β1（TGF-β1）刺激大鼠心肌成纖維細胞活化過程中DNA甲基化轉移酶3A （DNMT3A）的錶達變化情況。方法將30隻雄性SD大鼠處死，取大鼠心肌組織，以組織塊酶消化法分離細胞，通過差速貼壁離心法收集、培養大鼠心肌成纖維細胞。模型組的心肌成纖維細胞分彆給予TGF-β11、5、10μg · L-1，建立體外心肌成纖維細胞活化模型。MTT法檢測細胞增殖活性，酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測細胞上清液膠原含量，Western blot法檢測DNMT3A和α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）的蛋白錶達。結果與正常對照組相比較，模型組TGF-β1刺激細胞12、24、48 h後，血清中I型膠原和III型膠原的含量明顯增高，細胞增殖活性明顯增彊，Western blot檢測顯示模型組DNMT3A和α-SMA的錶達明顯高于正常對照組。結論心肌纖維化的形成可能與DNMT3A錶達上調有關，潛在的分子作用機製有待于進一步研究。
목적：탐토전화생장인-β1（TGF-β1）자격대서심기성섬유세포활화과정중DNA갑기화전이매3A （DNMT3A）적표체변화정황。방법장30지웅성SD대서처사，취대서심기조직，이조직괴매소화법분리세포，통과차속첩벽리심법수집、배양대서심기성섬유세포。모형조적심기성섬유세포분별급여TGF-β11、5、10μg · L-1，건입체외심기성섬유세포활화모형。MTT법검측세포증식활성，매련면역흡부법（ELISA）검측세포상청액효원함량，Western blot법검측DNMT3A화α평활기기동단백（α-SMA）적단백표체。결과여정상대조조상비교，모형조TGF-β1자격세포12、24、48 h후，혈청중I형효원화III형효원적함량명현증고，세포증식활성명현증강，Western blot검측현시모형조DNMT3A화α-SMA적표체명현고우정상대조조。결론심기섬유화적형성가능여DNMT3A표체상조유관，잠재적분자작용궤제유대우진일보연구。
Objective To observe the changes of expression of DNMT3A in the activation of Cardiac fibroblasts of rats under the stimu-lation of transforming growth factor-beta 1(TGF-β1).Methods Cardiac fibroblasts were isolated from 30 new-born male SD rats,andthe cells were used to establish the model of activation of cardiac fibroblasts by TGF-β1 in vitro.12 hours,24 hours and 48 hours afterbeing treated with TGF-β1,MTT were used to detect the cell proliferation activity.The content of collagen in supernatants was analyzedby enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).The protein expression of α-SMA and DNMT3A were analyzed by Western blot.Re-sults Compared with normal group,Western blot shows that the protein expression of α-SMA and DNMT3A are significantly increasedin model group.Conclusion The formation of Cardiac fibrosis may associate with the up-regulation of expression of DNMT3A,and thepotential molecular mechanisms of that still deserve to study further.
