华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
4期
558-563
,共6页
邓彦飞%刘真真%李云芳%刘庆友%罗婵%杨素芳%石德顺
鄧彥飛%劉真真%李雲芳%劉慶友%囉嬋%楊素芳%石德順
산언비%류진진%리운방%류경우%라선%양소방%석덕순
逆转录病毒载体%转基因%水牛%胎儿成纤维细胞
逆轉錄病毒載體%轉基因%水牛%胎兒成纖維細胞
역전록병독재체%전기인%수우%태인성섬유세포
retroviral vector%transgene%buffalo%fetal fibroblast
采用2种不同的逆转录病毒载体系统(pMX和pMSCV),构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组载体,探索能高效感染水牛胎儿成纤维细胞( BFFs)的病毒系统和感染方法。结果发现,2种逆转录病毒系统包装出的重组病毒滴度都能达到106,将pMX病毒系统生产的重组病毒经超速离心浓缩后,滴度可达到107;2种重组病毒都能感染BFFs,但pMX系统比pMSCV系统更能有效地感染BFFs;通过对病毒的感染方式进行比较,发现使用新鲜病毒连续感染BFFs 2次(每次间隔12 h),或者经过超速离心浓缩后的病毒感染BFFs 1次,可以显著提高感染效率。
採用2種不同的逆轉錄病毒載體繫統(pMX和pMSCV),構建攜帶綠色熒光蛋白(EGFP)基因的重組載體,探索能高效感染水牛胎兒成纖維細胞( BFFs)的病毒繫統和感染方法。結果髮現,2種逆轉錄病毒繫統包裝齣的重組病毒滴度都能達到106,將pMX病毒繫統生產的重組病毒經超速離心濃縮後,滴度可達到107;2種重組病毒都能感染BFFs,但pMX繫統比pMSCV繫統更能有效地感染BFFs;通過對病毒的感染方式進行比較,髮現使用新鮮病毒連續感染BFFs 2次(每次間隔12 h),或者經過超速離心濃縮後的病毒感染BFFs 1次,可以顯著提高感染效率。
채용2충불동적역전록병독재체계통(pMX화pMSCV),구건휴대록색형광단백(EGFP)기인적중조재체,탐색능고효감염수우태인성섬유세포( BFFs)적병독계통화감염방법。결과발현,2충역전록병독계통포장출적중조병독적도도능체도106,장pMX병독계통생산적중조병독경초속리심농축후,적도가체도107;2충중조병독도능감염BFFs,단pMX계통비pMSCV계통경능유효지감염BFFs;통과대병독적감염방식진행비교,발현사용신선병독련속감염BFFs 2차(매차간격12 h),혹자경과초속리심농축후적병독감염BFFs 1차,가이현저제고감염효솔。
After two retroviral systems with enhanced green fluorescent protein ( EGFP) report gene were constructed in this study , the retroviral systems and the infection method suitable for buffalo fetal fibro-blasts (BFFs) were investigated.The results revealed that the retrovirus titer of the two systems was 106, and the titer of the pMX system could be up to 10 7 after ultracentrifugation concentration .The infection efficiency of pMX retroviral system was higher than that of the pMSCV retroviral system .Using the fresh retrovirus infected BFFs twice (12 h interval) or ultracentrifugal retrovirus infected BFFs once could im-prove the infection efficiency .