中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2014年
8期
18-22
,共5页
曹守林%韩先干%王少辉%田明星%丁铲%王桂军%于圣青
曹守林%韓先榦%王少輝%田明星%丁鏟%王桂軍%于聖青
조수림%한선간%왕소휘%전명성%정산%왕계군%우골청
鸭%先天免疫受体%NOD1%荧光定量RT-PCR
鴨%先天免疫受體%NOD1%熒光定量RT-PCR
압%선천면역수체%NOD1%형광정량RT-PCR
为了建立鸭先天免疫受体核苷酸寡域1(NOD1)的荧光定量RT-PCR检测方法,依据GenBank中鸡NOD1序列设计特异性引物,克隆获得鸭NOD1序列,设计鸭NOD1、凋亡相关碱性蛋白(ARBP)荧光定量RT-PCR特异性引物,以鸭脾脏mRNA反转录后的cDNA为模板,通过构建质粒阳性标准品,建立检测鸭先天免疫受体NOD1转录水平的荧光定量RT-PCR方法.结果显示,建立的荧光定量RT-PCR方法对NOD1 mRNA的最低检测量为102拷贝,在1012～102拷贝范围内线性关系很好,R2≥0.999.该方法具有良好的特异性和重复性.应用于感染鸭疫里默氏杆菌Yb2株樱桃谷鸭脾脏中NOD1转录水平的检测,表明该方法可用于临床检测且适用性良好.
為瞭建立鴨先天免疫受體覈苷痠寡域1(NOD1)的熒光定量RT-PCR檢測方法,依據GenBank中鷄NOD1序列設計特異性引物,剋隆穫得鴨NOD1序列,設計鴨NOD1、凋亡相關堿性蛋白(ARBP)熒光定量RT-PCR特異性引物,以鴨脾髒mRNA反轉錄後的cDNA為模闆,通過構建質粒暘性標準品,建立檢測鴨先天免疫受體NOD1轉錄水平的熒光定量RT-PCR方法.結果顯示,建立的熒光定量RT-PCR方法對NOD1 mRNA的最低檢測量為102拷貝,在1012～102拷貝範圍內線性關繫很好,R2≥0.999.該方法具有良好的特異性和重複性.應用于感染鴨疫裏默氏桿菌Yb2株櫻桃穀鴨脾髒中NOD1轉錄水平的檢測,錶明該方法可用于臨床檢測且適用性良好.
위료건립압선천면역수체핵감산과역1(NOD1)적형광정량RT-PCR검측방법,의거GenBank중계NOD1서렬설계특이성인물,극륭획득압NOD1서렬,설계압NOD1、조망상관감성단백(ARBP)형광정량RT-PCR특이성인물,이압비장mRNA반전록후적cDNA위모판,통과구건질립양성표준품,건립검측압선천면역수체NOD1전록수평적형광정량RT-PCR방법.결과현시,건립적형광정량RT-PCR방법대NOD1 mRNA적최저검측량위102고패,재1012～102고패범위내선성관계흔호,R2≥0.999.해방법구유량호적특이성화중복성.응용우감염압역리묵씨간균Yb2주앵도곡압비장중NOD1전록수평적검측,표명해방법가용우림상검측차괄용성량호.
