基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
5期
589-594
,共6页
李娜%李琪%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
李娜%李琪%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
리나%리기%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
黏着斑激酶%机械压力%黏蛋白类%细胞外信号调节激酶
黏著斑激酶%機械壓力%黏蛋白類%細胞外信號調節激酶
점착반격매%궤계압력%점단백류%세포외신호조절격매
focal adhesion kinase%mechanical stress%mucins%extracellular signal-regulated kinase
目的 探讨黏着斑激酶(FAK)在机械压力诱导的人气道黏蛋白(MUC)5 AC分泌中的作用.方法 气液相界面培养人支气管上皮NHBE细胞,用Transwell压力实验装置间断性施压于NHBE细胞,黏着斑激酶(FAK) siRNA转染NHBE细胞,Western blot法检测FAK和p-ERK1/2蛋白含量,实时荧光定量PCR检测MUC5AC mRNA表达,ELISA法检测MUC5AC蛋白相对含量.结果 与空白对照组相比,机械压力能显著升高MUC5AC mRNA及蛋白含量及p-ERK1/2蛋白相对表达水平(均P＜0.01).FAK siRNA可显著降低机械压力所诱导的MUC5AC mRNA及蛋白含量的升高及p-ERK1/2蛋白表达(P＜0.01),但与转染FAKsiRNA对照组相比,机械压力+转染FAKsiRNA组细胞表达MUC5AC mRNA及蛋白水平和p-ERK1/2蛋白相对水平仍然是增加的(P＜0.05),PD98059能显著抑制机械压力所诱导的MUC5AC mRNA及蛋白表达水平的升高(P＜0.01).FAK siRNA联合AG1478作用于NHBE细胞则可显著抑制机械压力诱导的MUC5AC mRNA和蛋白表达(P＜0.01).AG1478单独作用能有效降低由机械压力所诱导的上述指标的升高(P＜0.05),但与AG1478对照组相比差异仍具有显著性.结论 机械压力诱导的MUC5AC高表达的信号传导通路为ERK依赖的,FAK为ERK的上游信号分子.
目的 探討黏著斑激酶(FAK)在機械壓力誘導的人氣道黏蛋白(MUC)5 AC分泌中的作用.方法 氣液相界麵培養人支氣管上皮NHBE細胞,用Transwell壓力實驗裝置間斷性施壓于NHBE細胞,黏著斑激酶(FAK) siRNA轉染NHBE細胞,Western blot法檢測FAK和p-ERK1/2蛋白含量,實時熒光定量PCR檢測MUC5AC mRNA錶達,ELISA法檢測MUC5AC蛋白相對含量.結果 與空白對照組相比,機械壓力能顯著升高MUC5AC mRNA及蛋白含量及p-ERK1/2蛋白相對錶達水平(均P＜0.01).FAK siRNA可顯著降低機械壓力所誘導的MUC5AC mRNA及蛋白含量的升高及p-ERK1/2蛋白錶達(P＜0.01),但與轉染FAKsiRNA對照組相比,機械壓力+轉染FAKsiRNA組細胞錶達MUC5AC mRNA及蛋白水平和p-ERK1/2蛋白相對水平仍然是增加的(P＜0.05),PD98059能顯著抑製機械壓力所誘導的MUC5AC mRNA及蛋白錶達水平的升高(P＜0.01).FAK siRNA聯閤AG1478作用于NHBE細胞則可顯著抑製機械壓力誘導的MUC5AC mRNA和蛋白錶達(P＜0.01).AG1478單獨作用能有效降低由機械壓力所誘導的上述指標的升高(P＜0.05),但與AG1478對照組相比差異仍具有顯著性.結論 機械壓力誘導的MUC5AC高錶達的信號傳導通路為ERK依賴的,FAK為ERK的上遊信號分子.
목적 탐토점착반격매(FAK)재궤계압력유도적인기도점단백(MUC)5 AC분비중적작용.방법 기액상계면배양인지기관상피NHBE세포,용Transwell압력실험장치간단성시압우NHBE세포,점착반격매(FAK) siRNA전염NHBE세포,Western blot법검측FAK화p-ERK1/2단백함량,실시형광정량PCR검측MUC5AC mRNA표체,ELISA법검측MUC5AC단백상대함량.결과 여공백대조조상비,궤계압력능현저승고MUC5AC mRNA급단백함량급p-ERK1/2단백상대표체수평(균P＜0.01).FAK siRNA가현저강저궤계압력소유도적MUC5AC mRNA급단백함량적승고급p-ERK1/2단백표체(P＜0.01),단여전염FAKsiRNA대조조상비,궤계압력+전염FAKsiRNA조세포표체MUC5AC mRNA급단백수평화p-ERK1/2단백상대수평잉연시증가적(P＜0.05),PD98059능현저억제궤계압력소유도적MUC5AC mRNA급단백표체수평적승고(P＜0.01).FAK siRNA연합AG1478작용우NHBE세포칙가현저억제궤계압력유도적MUC5AC mRNA화단백표체(P＜0.01).AG1478단독작용능유효강저유궤계압력소유도적상술지표적승고(P＜0.05),단여AG1478대조조상비차이잉구유현저성.결론 궤계압력유도적MUC5AC고표체적신호전도통로위ERK의뢰적,FAK위ERK적상유신호분자.
