厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2014年
3期
418-423
,共6页
张国广%郭迟鸣%欧阳莹%黄小君%陈亮
張國廣%郭遲鳴%歐暘瑩%黃小君%陳亮
장국엄%곽지명%구양형%황소군%진량
H5N1亚型禽流感病毒%qPCR%病毒样颗粒
H5N1亞型禽流感病毒%qPCR%病毒樣顆粒
H5N1아형금류감병독%qPCR%병독양과립
H5N1 avain influenza virus%qPCR%virus-like particles
合适的标准品对实时荧光定量PCR(qPCR)检测高致病性H5N1禽流感病毒(avain influenza virus,AIV)十分重要.本研究将H5N1 AIV HA基因的部分序列插入到能够表达MS2噬菌体病毒样颗粒(virus like particle,VLP) DNA序列的表达载体上,诱导表达后得到了包裹有H5N1 AIV HA基因RNA片段的VLP.该VLP能够耐受核酶的消化,形态与MS2噬菌体病毒颗粒形态相同.利用表达的VLP作为阳性标准品及设计的特异性荧光探针、淬灭链,使用优化的qPCR反应体系,得到qPCR检测H5N1亚型AIV的阳性对照标准曲线.研究结果为高致病性H5N1亚型AIV的准确定量检测提供了基础.
閤適的標準品對實時熒光定量PCR(qPCR)檢測高緻病性H5N1禽流感病毒(avain influenza virus,AIV)十分重要.本研究將H5N1 AIV HA基因的部分序列插入到能夠錶達MS2噬菌體病毒樣顆粒(virus like particle,VLP) DNA序列的錶達載體上,誘導錶達後得到瞭包裹有H5N1 AIV HA基因RNA片段的VLP.該VLP能夠耐受覈酶的消化,形態與MS2噬菌體病毒顆粒形態相同.利用錶達的VLP作為暘性標準品及設計的特異性熒光探針、淬滅鏈,使用優化的qPCR反應體繫,得到qPCR檢測H5N1亞型AIV的暘性對照標準麯線.研究結果為高緻病性H5N1亞型AIV的準確定量檢測提供瞭基礎.
합괄적표준품대실시형광정량PCR(qPCR)검측고치병성H5N1금류감병독(avain influenza virus,AIV)십분중요.본연구장H5N1 AIV HA기인적부분서렬삽입도능구표체MS2서균체병독양과립(virus like particle,VLP) DNA서렬적표체재체상,유도표체후득도료포과유H5N1 AIV HA기인RNA편단적VLP.해VLP능구내수핵매적소화,형태여MS2서균체병독과립형태상동.이용표체적VLP작위양성표준품급설계적특이성형광탐침、쉬멸련,사용우화적qPCR반응체계,득도qPCR검측H5N1아형AIV적양성대조표준곡선.연구결과위고치병성H5N1아형AIV적준학정량검측제공료기출.
