重庆理工大学学报（自然科学版）
重慶理工大學學報（自然科學版）
중경리공대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CHONGQING INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2014年
4期
68-71
,共4页
张存亮%聂福平%王昱%杨俊%李应国%蔡家利
張存亮%聶福平%王昱%楊俊%李應國%蔡傢利
장존량%섭복평%왕욱%양준%리응국%채가리
肺炎嗜衣原体%MOMP基因%克隆%原核表达
肺炎嗜衣原體%MOMP基因%剋隆%原覈錶達
폐염기의원체%MOMP기인%극륭%원핵표체
chlamydophila pneumoniae%MOMP gene%clone%prokaryotic expression
克隆了肺炎嗜衣原体外膜主蛋白(major out membrane protein,MOMP)基因,并进行了原核表达.根据GenBank公布的肺炎嗜衣原体MOMP基因序列,设计克隆引物后用普通PCR方法扩增出肺炎嗜衣原体MOMP基因的完整片段,将其克隆到pMD-19T后进行测序,经序列比对正确后将此片段亚克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达,再采用SDS-PAGE和Western-Blot检测重组蛋白的表达情况.结果表明:本研究克隆了肺炎嗜衣原体MOMP基因并在原核系统中成功表达了MOMP重组蛋白,且Western-Blot显示该重组蛋白具有免疫学活性.
剋隆瞭肺炎嗜衣原體外膜主蛋白(major out membrane protein,MOMP)基因,併進行瞭原覈錶達.根據GenBank公佈的肺炎嗜衣原體MOMP基因序列,設計剋隆引物後用普通PCR方法擴增齣肺炎嗜衣原體MOMP基因的完整片段,將其剋隆到pMD-19T後進行測序,經序列比對正確後將此片段亞剋隆到錶達載體pET-32a(+)中,轉化至大腸桿菌Rosetta(DE3),經IPTG誘導錶達,再採用SDS-PAGE和Western-Blot檢測重組蛋白的錶達情況.結果錶明:本研究剋隆瞭肺炎嗜衣原體MOMP基因併在原覈繫統中成功錶達瞭MOMP重組蛋白,且Western-Blot顯示該重組蛋白具有免疫學活性.
극륭료폐염기의원체외막주단백(major out membrane protein,MOMP)기인,병진행료원핵표체.근거GenBank공포적폐염기의원체MOMP기인서렬,설계극륭인물후용보통PCR방법확증출폐염기의원체MOMP기인적완정편단,장기극륭도pMD-19T후진행측서,경서렬비대정학후장차편단아극륭도표체재체pET-32a(+)중,전화지대장간균Rosetta(DE3),경IPTG유도표체,재채용SDS-PAGE화Western-Blot검측중조단백적표체정황.결과표명:본연구극륭료폐염기의원체MOMP기인병재원핵계통중성공표체료MOMP중조단백,차Western-Blot현시해중조단백구유면역학활성.
