中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2013年
9期
930-933
,共4页
林振%江建明%袁亮%冯瑞强%付兆宗%孟越%杨德鸿
林振%江建明%袁亮%馮瑞彊%付兆宗%孟越%楊德鴻
림진%강건명%원량%풍서강%부조종%맹월%양덕홍
成骨细胞%cDNA文库%酵母双杂交
成骨細胞%cDNA文庫%酵母雙雜交
성골세포%cDNA문고%효모쌍잡교
目的 构建乳鼠成骨细胞的酵母双杂交cDNA文库.方法 用TRIzol法提取乳鼠成骨细胞总RNA,按照SMART cDNA Library Construction Kit (CLONTECH)说明书反转录合成双链cDNA,Spin Column去除短片段,然后用同源重组的方法将双链cDNA和PGADT7-rec载体共转化到酵母细胞Y187中,建立文库并计算文库滴度.结果 提取的总RNA的A 260/A 280为1.99,琼脂糖凝胶电泳示28SrRNA、18SrRNA2条带,且28S与18S带亮度比值约为2.酵母文库库容为1.68×107,重组率为100%.插入片段PCR检测提示大小分布为1.5~4.0 kb,平均长度约为3.0 kb.结论 乳鼠成骨细胞酵母双杂交cDNA文库构建成功.
目的 構建乳鼠成骨細胞的酵母雙雜交cDNA文庫.方法 用TRIzol法提取乳鼠成骨細胞總RNA,按照SMART cDNA Library Construction Kit (CLONTECH)說明書反轉錄閤成雙鏈cDNA,Spin Column去除短片段,然後用同源重組的方法將雙鏈cDNA和PGADT7-rec載體共轉化到酵母細胞Y187中,建立文庫併計算文庫滴度.結果 提取的總RNA的A 260/A 280為1.99,瓊脂糖凝膠電泳示28SrRNA、18SrRNA2條帶,且28S與18S帶亮度比值約為2.酵母文庫庫容為1.68×107,重組率為100%.插入片段PCR檢測提示大小分佈為1.5~4.0 kb,平均長度約為3.0 kb.結論 乳鼠成骨細胞酵母雙雜交cDNA文庫構建成功.
목적 구건유서성골세포적효모쌍잡교cDNA문고.방법 용TRIzol법제취유서성골세포총RNA,안조SMART cDNA Library Construction Kit (CLONTECH)설명서반전록합성쌍련cDNA,Spin Column거제단편단,연후용동원중조적방법장쌍련cDNA화PGADT7-rec재체공전화도효모세포Y187중,건립문고병계산문고적도.결과 제취적총RNA적A 260/A 280위1.99,경지당응효전영시28SrRNA、18SrRNA2조대,차28S여18S대량도비치약위2.효모문고고용위1.68×107,중조솔위100%.삽입편단PCR검측제시대소분포위1.5~4.0 kb,평균장도약위3.0 kb.결론 유서성골세포효모쌍잡교cDNA문고구건성공.
