检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2013年
9期
845-850
,共6页
黎毓光%何金花%王莉%谢杏仪%陈顺仪%陈武嘉%黄国贤
黎毓光%何金花%王莉%謝杏儀%陳順儀%陳武嘉%黃國賢
려육광%하금화%왕리%사행의%진순의%진무가%황국현
反义核酸%Apollon%增殖%凋亡%HepG2细胞%肝癌
反義覈痠%Apollon%增殖%凋亡%HepG2細胞%肝癌
반의핵산%Apollon%증식%조망%HepG2세포%간암
Antisense oligodeoxynucleotide%Apollon%Proliferation%Apoptosis%HepG2 cell%Liver cancer
目的 研究凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员Apollon反义核酸(ASO)对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将化学合成的Apollon ASO经脂质体包裹后作用于肝癌HepG2细胞48 h,采用WST-8法检测不同浓度的Apollon ASO对肝癌细胞增殖抑制作用,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)检测细胞Apollon mRNA的表达水平；流式细胞术检测细胞早期凋亡率；Hochest33258染色观察HepG2细胞凋亡形态；线粒体膜电位检测细胞凋亡；比色法测定半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3、Caspase-9)活性的改变；蛋白质免疫印记技术检测细胞色素C蛋白的表达水平.结果 Apollon ASO转染HepG2细胞48 h能明显抑制细胞增殖,并呈浓度依赖关系.Apollon ASO能促进HepG2细胞凋亡.不同浓度的Apollon ASO能显著下调Apollon mRNA的表达水平,同时Caspase-3、Caspase-9的活性明显增加,细胞色素C蛋白表达水平也增加.经荧光显微镜观察,ASO组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体.结论 Apollon ASO可下调Apollon mRNA表达水平,抑制HepG2细胞增殖,其诱导细胞早期凋亡可能通过线粒体介导的途径.
目的 研究凋亡抑製蛋白(IAP)傢族成員Apollon反義覈痠(ASO)對人肝癌HepG2細胞增殖、凋亡的影響,併探討其機製.方法 將化學閤成的Apollon ASO經脂質體包裹後作用于肝癌HepG2細胞48 h,採用WST-8法檢測不同濃度的Apollon ASO對肝癌細胞增殖抑製作用,實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(PCR)檢測細胞Apollon mRNA的錶達水平；流式細胞術檢測細胞早期凋亡率；Hochest33258染色觀察HepG2細胞凋亡形態；線粒體膜電位檢測細胞凋亡；比色法測定半胱氨痠蛋白酶(Caspase-3、Caspase-9)活性的改變；蛋白質免疫印記技術檢測細胞色素C蛋白的錶達水平.結果 Apollon ASO轉染HepG2細胞48 h能明顯抑製細胞增殖,併呈濃度依賴關繫.Apollon ASO能促進HepG2細胞凋亡.不同濃度的Apollon ASO能顯著下調Apollon mRNA的錶達水平,同時Caspase-3、Caspase-9的活性明顯增加,細胞色素C蛋白錶達水平也增加.經熒光顯微鏡觀察,ASO組可見覈高彊度熒光的細胞,併見凋亡小體.結論 Apollon ASO可下調Apollon mRNA錶達水平,抑製HepG2細胞增殖,其誘導細胞早期凋亡可能通過線粒體介導的途徑.
목적 연구조망억제단백(IAP)가족성원Apollon반의핵산(ASO)대인간암HepG2세포증식、조망적영향,병탐토기궤제.방법 장화학합성적Apollon ASO경지질체포과후작용우간암HepG2세포48 h,채용WST-8법검측불동농도적Apollon ASO대간암세포증식억제작용,실시형광정량역전록취합매련반응(PCR)검측세포Apollon mRNA적표체수평；류식세포술검측세포조기조망솔；Hochest33258염색관찰HepG2세포조망형태；선립체막전위검측세포조망；비색법측정반광안산단백매(Caspase-3、Caspase-9)활성적개변；단백질면역인기기술검측세포색소C단백적표체수평.결과 Apollon ASO전염HepG2세포48 h능명현억제세포증식,병정농도의뢰관계.Apollon ASO능촉진HepG2세포조망.불동농도적Apollon ASO능현저하조Apollon mRNA적표체수평,동시Caspase-3、Caspase-9적활성명현증가,세포색소C단백표체수평야증가.경형광현미경관찰,ASO조가견핵고강도형광적세포,병견조망소체.결론 Apollon ASO가하조Apollon mRNA표체수평,억제HepG2세포증식,기유도세포조기조망가능통과선립체개도적도경.
