南昌大学学报（医学版）
南昌大學學報（醫學版）
남창대학학보（의학판）
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2014年
1期
1-3
,共3页
刘芬%曾振国%李勇%黄彩雪%赵宁%钱克俭
劉芬%曾振國%李勇%黃綵雪%趙寧%錢剋儉
류분%증진국%리용%황채설%조저%전극검
线粒体DNA%肺泡巨噬细胞%炎症因子%动物,实验%大鼠
線粒體DNA%肺泡巨噬細胞%炎癥因子%動物,實驗%大鼠
선립체DNA%폐포거서세포%염증인자%동물,실험%대서
mitochondrial DNA%alveolar macrophages%inflammatory cytokines%animals,laboratory%rats
目的：观察线粒体 DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）刺激肺泡巨噬细胞后炎症因子的动态变化，探讨mtDNA 对肺泡巨噬细胞的致炎效应。方法取 SD大鼠肝脏组织用改良的碱变性法进行 mtDNA 的提取、纯化。将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）分为mtDNA组（5μg·mL-1，A组），mtDNA组（10μg·mL-1，B组），空白对照组（C组），分别在 A、B组中加入mtDNA 5μg·mL-1、10μg·mL-1，在0、3、6、12和24 h时相点收集各组细胞培养上清液，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和 IL-6的表达水平。结果 A组和B组在3、6、12和24 h TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量显著高于C组（P＜0．01），且在3、6、12和24 h 时B组的表达量高于 A组（P＜0．05）。结论 mtDNA 能够诱导肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β和 IL-6等炎症因子的表达，且呈剂量依赖性，推测mtDNA 具有促炎作用。
目的：觀察線粒體 DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）刺激肺泡巨噬細胞後炎癥因子的動態變化，探討mtDNA 對肺泡巨噬細胞的緻炎效應。方法取 SD大鼠肝髒組織用改良的堿變性法進行 mtDNA 的提取、純化。將體外培養的大鼠肺泡巨噬細胞（NR8383）分為mtDNA組（5μg·mL-1，A組），mtDNA組（10μg·mL-1，B組），空白對照組（C組），分彆在 A、B組中加入mtDNA 5μg·mL-1、10μg·mL-1，在0、3、6、12和24 h時相點收集各組細胞培養上清液，採用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測細胞培養上清液中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和 IL-6的錶達水平。結果 A組和B組在3、6、12和24 h TNF-α、IL-1β和IL-6的錶達量顯著高于C組（P＜0．01），且在3、6、12和24 h 時B組的錶達量高于 A組（P＜0．05）。結論 mtDNA 能夠誘導肺泡巨噬細胞TNF-α、IL-1β和 IL-6等炎癥因子的錶達，且呈劑量依賴性，推測mtDNA 具有促炎作用。
목적：관찰선립체 DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）자격폐포거서세포후염증인자적동태변화，탐토mtDNA 대폐포거서세포적치염효응。방법취 SD대서간장조직용개량적감변성법진행 mtDNA 적제취、순화。장체외배양적대서폐포거서세포（NR8383）분위mtDNA조（5μg·mL-1，A조），mtDNA조（10μg·mL-1，B조），공백대조조（C조），분별재 A、B조중가입mtDNA 5μg·mL-1、10μg·mL-1，재0、3、6、12화24 h시상점수집각조세포배양상청액，채용매련면역흡부법（ELISA）검측세포배양상청액중종류배사인자-α（TNF-α）、백개소-1β（IL-1β）화 IL-6적표체수평。결과 A조화B조재3、6、12화24 h TNF-α、IL-1β화IL-6적표체량현저고우C조（P＜0．01），차재3、6、12화24 h 시B조적표체량고우 A조（P＜0．05）。결론 mtDNA 능구유도폐포거서세포TNF-α、IL-1β화 IL-6등염증인자적표체，차정제량의뢰성，추측mtDNA 구유촉염작용。
Obj ective To observe the dynamic changes in inflammatory cytokines in alveolar macro-phages stimulated by mitochondrial DNA(mtDNA),and to explore the inflammatory effect of mtDNA on alveolar macrophages.Methods The mtDNA was extracted and purified from SD rat liver tissue using a modified alkaline denaturation method.The cultured alveolar macrophages(NR8383)were divided into three groups:group A(treatment with 5μg·mL-1 mtDNA),group B(treatment with 10μg·mL-1 mtDNA),and group C(control group).Culture supernatant was collected after treatment for 0,3,6,12 and 24 hours,and levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-1β(IL-1β)and interleukin-6 (IL-6)were measured by ELISA.Results Compared with control group,mtDNA treatment significantly increased the expression of TNF-α,IL-1βand IL-6 in a dose-dependent manner after treatment for 3,6,12 and 24 hours (P<0.01 or P<0.05 ).Conclusion The mtDNA can stimulate alveolar macrophages to produce TNF-α,IL-1βand IL-6 in a dose-dependent manner,suggesting that mtDNA has a proinflamma-tory effect on alveolar macrophages.
