实验室研究与探索
實驗室研究與探索
실험실연구여탐색
LAABORATORY REESEARCH AND EXPLORATION
2013年
8期
13-16
,共4页
李超英%黄先恺%杨光参%王艳伟
李超英%黃先愷%楊光參%王豔偉
리초영%황선개%양광삼%왕염위
原子力显微镜%DNA%限制性内切酶%相互作用
原子力顯微鏡%DNA%限製性內切酶%相互作用
원자력현미경%DNA%한제성내절매%상호작용
atomic force microscope (AFM)%DNA%restriction endonuclease%interaction
原子力显微镜是观察DNA与内切酶相互作用比较有效的研究技术.实验中,首先把不同种类的内切酶与DNA在含有钙离子的缓冲液中培育30 min,再通过原子力成像观察其相互作用后的复合物形貌.结果表明,二聚体内切酶EcoRV会结合到λ-DNA的单个识别位点,最终形成珠串状结构,而且对DNA有弯曲作用；另一类型四聚体内切酶BspMI除了可以结合λ-DNA的单个位点外,还可以结合2个识别位点而形成圆环状结构.此结果可以直观地观察到两种内切酶与DNA的作用形态,同时对DNA的弯曲与成环等结构给出直接证椐.最后给出两种内切酶与DNA相互作用的模型图.
原子力顯微鏡是觀察DNA與內切酶相互作用比較有效的研究技術.實驗中,首先把不同種類的內切酶與DNA在含有鈣離子的緩遲液中培育30 min,再通過原子力成像觀察其相互作用後的複閤物形貌.結果錶明,二聚體內切酶EcoRV會結閤到λ-DNA的單箇識彆位點,最終形成珠串狀結構,而且對DNA有彎麯作用；另一類型四聚體內切酶BspMI除瞭可以結閤λ-DNA的單箇位點外,還可以結閤2箇識彆位點而形成圓環狀結構.此結果可以直觀地觀察到兩種內切酶與DNA的作用形態,同時對DNA的彎麯與成環等結構給齣直接證椐.最後給齣兩種內切酶與DNA相互作用的模型圖.
원자력현미경시관찰DNA여내절매상호작용비교유효적연구기술.실험중,수선파불동충류적내절매여DNA재함유개리자적완충액중배육30 min,재통과원자력성상관찰기상호작용후적복합물형모.결과표명,이취체내절매EcoRV회결합도λ-DNA적단개식별위점,최종형성주천상결구,이차대DNA유만곡작용；령일류형사취체내절매BspMI제료가이결합λ-DNA적단개위점외,환가이결합2개식별위점이형성원배상결구.차결과가이직관지관찰도량충내절매여DNA적작용형태,동시대DNA적만곡여성배등결구급출직접증거.최후급출량충내절매여DNA상호작용적모형도.
