中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
9期
752-755
,共4页
蒋伟%王喜军%帅磊%葛金英%任家琰%步志高
蔣偉%王喜軍%帥磊%葛金英%任傢琰%步誌高
장위%왕희군%수뢰%갈금영%임가염%보지고
狂犬病病毒%DNA疫苗%G蛋白
狂犬病病毒%DNA疫苗%G蛋白
광견병병독%DNA역묘%G단백
rabies virus%DNA immunization%G protein
狂犬病病毒(RV)囊膜糖蛋白(G)是该病毒诱导保护性免疫反应的主要抗原.为研究G蛋白基因的DNA免疫效果,本研究构建了表达哺乳动物密码子优化的RVG基因的重组真核表达质粒pCAGG-RVG,间接免疫荧光试验及westem blot结果表明,重组RV G基因在pCAGG-RVG转染的BHK-21细胞中获得正确表达.将pCAGG-RVG按500 μg剂量经肌肉注射途径免疫比格犬,间隔4周以相同剂量、途径加强免疫一次,并于初次免疫前、后不同时间检测血清RV的中和抗体.结果显示,pCAGG-RVG一次免疫即可诱导产生显著的中和抗体反应,二次免疫中和抗体滴度表现出显著地增强效果.二次免疫后,中和抗体滴度缓慢下降,保持持续平稳,至初次免疫后第54周,7只免疫犬病毒中和抗体滴度平均为2.88 IU/mL,并且全部高于0.5 IU/mL,即全部高于对强毒攻击保护的最低中和抗体滴度要求.因此,本研究构建的pCAGG-RVG具有预防狂犬病的潜力,是一种有希望的狂犬病候选疫苗.
狂犬病病毒(RV)囊膜糖蛋白(G)是該病毒誘導保護性免疫反應的主要抗原.為研究G蛋白基因的DNA免疫效果,本研究構建瞭錶達哺乳動物密碼子優化的RVG基因的重組真覈錶達質粒pCAGG-RVG,間接免疫熒光試驗及westem blot結果錶明,重組RV G基因在pCAGG-RVG轉染的BHK-21細胞中穫得正確錶達.將pCAGG-RVG按500 μg劑量經肌肉註射途徑免疫比格犬,間隔4週以相同劑量、途徑加彊免疫一次,併于初次免疫前、後不同時間檢測血清RV的中和抗體.結果顯示,pCAGG-RVG一次免疫即可誘導產生顯著的中和抗體反應,二次免疫中和抗體滴度錶現齣顯著地增彊效果.二次免疫後,中和抗體滴度緩慢下降,保持持續平穩,至初次免疫後第54週,7隻免疫犬病毒中和抗體滴度平均為2.88 IU/mL,併且全部高于0.5 IU/mL,即全部高于對彊毒攻擊保護的最低中和抗體滴度要求.因此,本研究構建的pCAGG-RVG具有預防狂犬病的潛力,是一種有希望的狂犬病候選疫苗.
광견병병독(RV)낭막당단백(G)시해병독유도보호성면역반응적주요항원.위연구G단백기인적DNA면역효과,본연구구건료표체포유동물밀마자우화적RVG기인적중조진핵표체질립pCAGG-RVG,간접면역형광시험급westem blot결과표명,중조RV G기인재pCAGG-RVG전염적BHK-21세포중획득정학표체.장pCAGG-RVG안500 μg제량경기육주사도경면역비격견,간격4주이상동제량、도경가강면역일차,병우초차면역전、후불동시간검측혈청RV적중화항체.결과현시,pCAGG-RVG일차면역즉가유도산생현저적중화항체반응,이차면역중화항체적도표현출현저지증강효과.이차면역후,중화항체적도완만하강,보지지속평은,지초차면역후제54주,7지면역견병독중화항체적도평균위2.88 IU/mL,병차전부고우0.5 IU/mL,즉전부고우대강독공격보호적최저중화항체적도요구.인차,본연구구건적pCAGG-RVG구유예방광견병적잠력,시일충유희망적광견병후선역묘.