中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2013年
4期
480-483
,共4页
史留斌%宋宁%王燕%张群华
史留斌%宋寧%王燕%張群華
사류빈%송저%왕연%장군화
结肠癌%真核翻译起始因子%RNA干扰
結腸癌%真覈翻譯起始因子%RNA榦擾
결장암%진핵번역기시인자%RNA간우
Colon cancer%Eukaryotic translation initiation factor%RNA interference
目的:探讨真核翻译起始因子-3c(eukaryotic translation initiation factor 3c,eIF3c)在结肠癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响.方法:在5种结肠癌细胞株(RKO,HCT116,SW480,SW620和LoVo)中检测eIF3c的mRNA水平.构建eIF3c特异性siRNA慢病毒载体,用其感染结肠癌细胞,并设对照组.采用Real-time PCR和Western blotting方法分别从mRNA和蛋白质水平检测eIF3c基因的表达情况,通过MTT和集落形成实验观察结肠癌细胞的增殖率,评估eIF3c对结肠癌细胞增殖能力的影响.结果:5种结肠癌细胞株中eIF3c均为高表达,以RKO细胞中eIF3c表达最高,故被用于进一步RNA干扰研究.成功构建eIF3c-shRNA干扰体系并稳定转染RKO细胞后,与对照组比较,干扰组eIF3c mRNA下降了70％(P＜0.001),蛋白表达水平明显降低;MTT结果显示,干扰组细胞增殖水平明显低于阴性对照组(1∶60,P＜0.01);沉默eIF3c导致RKO细胞的集落数量显著减少,为对照组的35％ (P＜0.01),集落大小显著小于对照组;eIF3c与细胞周期相关,沉默eIF3c导致G0/G1期细胞的比例增加了8％ (P＜0.001),G2/M期细胞的比例增加了5％(P＜0.01),S期细胞的比例显著减少(12％),P＜0.001.结论:eIF3c在结肠癌细胞中高表达,沉默eIF3c基因可显著抑制结肠癌细胞的增殖能力,提示eIF3c在结肠癌的发生、发展中起重要作用,抑制eIF3c的表达有望被用于治疗结肠癌.
目的:探討真覈翻譯起始因子-3c(eukaryotic translation initiation factor 3c,eIF3c)在結腸癌細胞中的錶達及其對細胞增殖的影響.方法:在5種結腸癌細胞株(RKO,HCT116,SW480,SW620和LoVo)中檢測eIF3c的mRNA水平.構建eIF3c特異性siRNA慢病毒載體,用其感染結腸癌細胞,併設對照組.採用Real-time PCR和Western blotting方法分彆從mRNA和蛋白質水平檢測eIF3c基因的錶達情況,通過MTT和集落形成實驗觀察結腸癌細胞的增殖率,評估eIF3c對結腸癌細胞增殖能力的影響.結果:5種結腸癌細胞株中eIF3c均為高錶達,以RKO細胞中eIF3c錶達最高,故被用于進一步RNA榦擾研究.成功構建eIF3c-shRNA榦擾體繫併穩定轉染RKO細胞後,與對照組比較,榦擾組eIF3c mRNA下降瞭70％(P＜0.001),蛋白錶達水平明顯降低;MTT結果顯示,榦擾組細胞增殖水平明顯低于陰性對照組(1∶60,P＜0.01);沉默eIF3c導緻RKO細胞的集落數量顯著減少,為對照組的35％ (P＜0.01),集落大小顯著小于對照組;eIF3c與細胞週期相關,沉默eIF3c導緻G0/G1期細胞的比例增加瞭8％ (P＜0.001),G2/M期細胞的比例增加瞭5％(P＜0.01),S期細胞的比例顯著減少(12％),P＜0.001.結論:eIF3c在結腸癌細胞中高錶達,沉默eIF3c基因可顯著抑製結腸癌細胞的增殖能力,提示eIF3c在結腸癌的髮生、髮展中起重要作用,抑製eIF3c的錶達有望被用于治療結腸癌.
목적:탐토진핵번역기시인자-3c(eukaryotic translation initiation factor 3c,eIF3c)재결장암세포중적표체급기대세포증식적영향.방법:재5충결장암세포주(RKO,HCT116,SW480,SW620화LoVo)중검측eIF3c적mRNA수평.구건eIF3c특이성siRNA만병독재체,용기감염결장암세포,병설대조조.채용Real-time PCR화Western blotting방법분별종mRNA화단백질수평검측eIF3c기인적표체정황,통과MTT화집락형성실험관찰결장암세포적증식솔,평고eIF3c대결장암세포증식능력적영향.결과:5충결장암세포주중eIF3c균위고표체,이RKO세포중eIF3c표체최고,고피용우진일보RNA간우연구.성공구건eIF3c-shRNA간우체계병은정전염RKO세포후,여대조조비교,간우조eIF3c mRNA하강료70％(P＜0.001),단백표체수평명현강저;MTT결과현시,간우조세포증식수평명현저우음성대조조(1∶60,P＜0.01);침묵eIF3c도치RKO세포적집락수량현저감소,위대조조적35％ (P＜0.01),집락대소현저소우대조조;eIF3c여세포주기상관,침묵eIF3c도치G0/G1기세포적비례증가료8％ (P＜0.001),G2/M기세포적비례증가료5％(P＜0.01),S기세포적비례현저감소(12％),P＜0.001.결론:eIF3c재결장암세포중고표체,침묵eIF3c기인가현저억제결장암세포적증식능력,제시eIF3c재결장암적발생、발전중기중요작용,억제eIF3c적표체유망피용우치료결장암.
