中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2013年
4期
457-461
,共5页
洪洋%霍建忠%郭常安%陈峥嵘%董有海
洪洋%霍建忠%郭常安%陳崢嶸%董有海
홍양%곽건충%곽상안%진쟁영%동유해
骨髓间充质干细胞%壳聚糖%组织工程%关节软骨
骨髓間充質榦細胞%殼聚糖%組織工程%關節軟骨
골수간충질간세포%각취당%조직공정%관절연골
Bone marrow-derived mesenchymal stem cells%Chitosan%Tissue engineering%Articular cartilage
目的:体外培养骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)并以壳聚糖作为组织工程细胞外支架构建组织工程软骨,探讨其在软骨组织工程中的应用.方法:分离兔BM-MSCs并进行体外传代培养.观察细胞形态及其变化,检测免疫表型CD71的表达;绘制并比较不同代次细胞的生长曲线.传代培养后,检测第2、3、4代BM-MSCs的软骨特异性Ⅱ型胶原(collagenⅡ,ColⅡ)的mRNA的表达.取6只新西兰成年白兔,随机分为两组,A组为单纯壳聚糖支架修复组,B组为壳聚糖支架复合BM-MSCs修复组.分别于术后4、8周处死动物,观察新生区软骨组织修复情况.结果:体外培养获得高纯度且传代能力强的BM-MSCs.修复术后4周,A组仅有纤维组织增生,甲苯胺蓝染色较淡;B组关节软组织缺损处有软骨样组织及胶原生成.术后8周,B组关节软骨缺损处有较明显的软骨组织增生;A组仅在与正常软骨交界处有少量的软骨组织生成;免疫组织化学显示B组ColⅡ有表达.结论:密度梯度离心法联合差速贴壁法能提高BM-MSCs的纯度,通过该途径获得的BM-MSCs可作为软骨组织工程的种子细胞.壳聚糖是比较理想的新型软骨组织工程支架,以BM-MSCs复合壳聚糖构建的组织工程软骨能够较好地修复兔关节软骨缺损.
目的:體外培養骨髓間充質榦細胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)併以殼聚糖作為組織工程細胞外支架構建組織工程軟骨,探討其在軟骨組織工程中的應用.方法:分離兔BM-MSCs併進行體外傳代培養.觀察細胞形態及其變化,檢測免疫錶型CD71的錶達;繪製併比較不同代次細胞的生長麯線.傳代培養後,檢測第2、3、4代BM-MSCs的軟骨特異性Ⅱ型膠原(collagenⅡ,ColⅡ)的mRNA的錶達.取6隻新西蘭成年白兔,隨機分為兩組,A組為單純殼聚糖支架脩複組,B組為殼聚糖支架複閤BM-MSCs脩複組.分彆于術後4、8週處死動物,觀察新生區軟骨組織脩複情況.結果:體外培養穫得高純度且傳代能力彊的BM-MSCs.脩複術後4週,A組僅有纖維組織增生,甲苯胺藍染色較淡;B組關節軟組織缺損處有軟骨樣組織及膠原生成.術後8週,B組關節軟骨缺損處有較明顯的軟骨組織增生;A組僅在與正常軟骨交界處有少量的軟骨組織生成;免疫組織化學顯示B組ColⅡ有錶達.結論:密度梯度離心法聯閤差速貼壁法能提高BM-MSCs的純度,通過該途徑穫得的BM-MSCs可作為軟骨組織工程的種子細胞.殼聚糖是比較理想的新型軟骨組織工程支架,以BM-MSCs複閤殼聚糖構建的組織工程軟骨能夠較好地脩複兔關節軟骨缺損.
목적:체외배양골수간충질간세포(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)병이각취당작위조직공정세포외지가구건조직공정연골,탐토기재연골조직공정중적응용.방법:분리토BM-MSCs병진행체외전대배양.관찰세포형태급기변화,검측면역표형CD71적표체;회제병비교불동대차세포적생장곡선.전대배양후,검측제2、3、4대BM-MSCs적연골특이성Ⅱ형효원(collagenⅡ,ColⅡ)적mRNA적표체.취6지신서란성년백토,수궤분위량조,A조위단순각취당지가수복조,B조위각취당지가복합BM-MSCs수복조.분별우술후4、8주처사동물,관찰신생구연골조직수복정황.결과:체외배양획득고순도차전대능력강적BM-MSCs.수복술후4주,A조부유섬유조직증생,갑분알람염색교담;B조관절연조직결손처유연골양조직급효원생성.술후8주,B조관절연골결손처유교명현적연골조직증생;A조부재여정상연골교계처유소량적연골조직생성;면역조직화학현시B조ColⅡ유표체.결론:밀도제도리심법연합차속첩벽법능제고BM-MSCs적순도,통과해도경획득적BM-MSCs가작위연골조직공정적충자세포.각취당시비교이상적신형연골조직공정지가,이BM-MSCs복합각취당구건적조직공정연골능구교호지수복토관절연골결손.
