安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
14期
4199-4201
,共3页
顾菊%韩娇%董万春%阳立波%曹树青
顧菊%韓嬌%董萬春%暘立波%曹樹青
고국%한교%동만춘%양립파%조수청
拟南芥(Arabidopsis athaliana)%bZIP23%互补和过量表达载体%转基因植株
擬南芥(Arabidopsis athaliana)%bZIP23%互補和過量錶達載體%轉基因植株
의남개(Arabidopsis athaliana)%bZIP23%호보화과량표체재체%전기인식주
Arabidopsis thaliana%bZIP23%Complementary and overexpression vector%Genetically modified plant
[目的]以拟南芥为材料克隆bZIP23基因,构建bZIP23基因的过量表达载体和筛选过表达植株,为验证其功能奠定基础.[方法]提取拟南芥总RNA和RT-PCR克隆bZIP23基因,用限制性内切酶切割和T4 DNA连接酶连接,使bZIP23基因连接到35S强启动子的pART27载体上;将连接产物转化到Trans1-T1感受态细胞中,筛选阳性单克隆进行菌落PCR鉴定并测序验证,获得重组质粒.将该重组质粒电激转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,浸花法转化拟南芥野生型植株.[结果]通过单菌落PCR鉴定和DNA测序结果显示,bZIP23基因与35S过量表达载体已连接,获得了重组载体;抗性筛选与遗传鉴定获得相应的转基因过量表达阳性植株.[结论]构建的过量表达载体及筛选得到的过量表达植株为验证bZIP23基因功能奠定了基础.
[目的]以擬南芥為材料剋隆bZIP23基因,構建bZIP23基因的過量錶達載體和篩選過錶達植株,為驗證其功能奠定基礎.[方法]提取擬南芥總RNA和RT-PCR剋隆bZIP23基因,用限製性內切酶切割和T4 DNA連接酶連接,使bZIP23基因連接到35S彊啟動子的pART27載體上;將連接產物轉化到Trans1-T1感受態細胞中,篩選暘性單剋隆進行菌落PCR鑒定併測序驗證,穫得重組質粒.將該重組質粒電激轉化至根瘤農桿菌GV3101菌株,浸花法轉化擬南芥野生型植株.[結果]通過單菌落PCR鑒定和DNA測序結果顯示,bZIP23基因與35S過量錶達載體已連接,穫得瞭重組載體;抗性篩選與遺傳鑒定穫得相應的轉基因過量錶達暘性植株.[結論]構建的過量錶達載體及篩選得到的過量錶達植株為驗證bZIP23基因功能奠定瞭基礎.
[목적]이의남개위재료극륭bZIP23기인,구건bZIP23기인적과량표체재체화사선과표체식주,위험증기공능전정기출.[방법]제취의남개총RNA화RT-PCR극륭bZIP23기인,용한제성내절매절할화T4 DNA련접매련접,사bZIP23기인련접도35S강계동자적pART27재체상;장련접산물전화도Trans1-T1감수태세포중,사선양성단극륭진행균락PCR감정병측서험증,획득중조질립.장해중조질립전격전화지근류농간균GV3101균주,침화법전화의남개야생형식주.[결과]통과단균락PCR감정화DNA측서결과현시,bZIP23기인여35S과량표체재체이련접,획득료중조재체;항성사선여유전감정획득상응적전기인과량표체양성식주.[결론]구건적과량표체재체급사선득도적과량표체식주위험증bZIP23기인공능전정료기출.
