中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2013年
4期
42-46,后插2
,共6页
赵文秀%张正奇%许雅苹%吴端%尹震宇%王效民
趙文秀%張正奇%許雅蘋%吳耑%尹震宇%王效民
조문수%장정기%허아평%오단%윤진우%왕효민
髓系来源抑制性细胞%肝癌%荧光激活细胞分选%流式分选%抗体%骨髓%小鼠
髓繫來源抑製性細胞%肝癌%熒光激活細胞分選%流式分選%抗體%骨髓%小鼠
수계래원억제성세포%간암%형광격활세포분선%류식분선%항체%골수%소서
Myeloid-derived suppressor cells%Hepatocellular carcinoma%Fluorescence-activated cell sorting%Flow cytometry%Antibody%Bone marrow%Mice
目的 比较不同的流式抗体分选小鼠原位肝癌模型骨髓中的髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs).方法 建立BALB/c小鼠原位肝癌移植模型,10d后分离荷瘤小鼠骨髓细胞,分别进行CD11b、Gr-1单色标记及CD11b和Gr-1双色标记后,进行流式分选.比较这三种方式分选的MDSCs纯度、活力,并检测分选的细胞精氨酸代谢酶1(arginase-1,Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达,并通过活性氧检测试剂盒检测MDSCs活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达.结果 三种方法分选到的细胞活力和纯度都大于90％.CD11b标记进行分选操作最为方便,易于统一,但纯度略差;Gr-1标记进行分选时,细胞群不好确定,但纯度高;双色标记进行分选纯度最高.分选的细胞高表达Arg-1、iNOS和ROS.结论 三种抗体标记方法均能从小鼠原位肝癌模型骨髓中的分选到纯度高、活力好的MDSCs,而用CD11b单色标记操作方便,易于统一,可作为首选方法.MDSCs的成功分选,对于后续开展MDSCs的生物学和免疫学功能研究奠定了基础.
目的 比較不同的流式抗體分選小鼠原位肝癌模型骨髓中的髓繫來源抑製性細胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs).方法 建立BALB/c小鼠原位肝癌移植模型,10d後分離荷瘤小鼠骨髓細胞,分彆進行CD11b、Gr-1單色標記及CD11b和Gr-1雙色標記後,進行流式分選.比較這三種方式分選的MDSCs純度、活力,併檢測分選的細胞精氨痠代謝酶1(arginase-1,Arg-1)和誘導型一氧化氮閤酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的錶達,併通過活性氧檢測試劑盒檢測MDSCs活性氧(reactive oxygen species,ROS)錶達.結果 三種方法分選到的細胞活力和純度都大于90％.CD11b標記進行分選操作最為方便,易于統一,但純度略差;Gr-1標記進行分選時,細胞群不好確定,但純度高;雙色標記進行分選純度最高.分選的細胞高錶達Arg-1、iNOS和ROS.結論 三種抗體標記方法均能從小鼠原位肝癌模型骨髓中的分選到純度高、活力好的MDSCs,而用CD11b單色標記操作方便,易于統一,可作為首選方法.MDSCs的成功分選,對于後續開展MDSCs的生物學和免疫學功能研究奠定瞭基礎.
목적 비교불동적류식항체분선소서원위간암모형골수중적수계래원억제성세포(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs).방법 건립BALB/c소서원위간암이식모형,10d후분리하류소서골수세포,분별진행CD11b、Gr-1단색표기급CD11b화Gr-1쌍색표기후,진행류식분선.비교저삼충방식분선적MDSCs순도、활력,병검측분선적세포정안산대사매1(arginase-1,Arg-1)화유도형일양화담합매(inducible nitric oxide synthase,iNOS)적표체,병통과활성양검측시제합검측MDSCs활성양(reactive oxygen species,ROS)표체.결과 삼충방법분선도적세포활력화순도도대우90％.CD11b표기진행분선조작최위방편,역우통일,단순도략차;Gr-1표기진행분선시,세포군불호학정,단순도고;쌍색표기진행분선순도최고.분선적세포고표체Arg-1、iNOS화ROS.결론 삼충항체표기방법균능종소서원위간암모형골수중적분선도순도고、활력호적MDSCs,이용CD11b단색표기조작방편,역우통일,가작위수선방법.MDSCs적성공분선,대우후속개전MDSCs적생물학화면역학공능연구전정료기출.
