中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
5期
672-680
,共9页
杨子波%傅明%张紫机%黄保丁%张志奇%廖威明
楊子波%傅明%張紫機%黃保丁%張誌奇%廖威明
양자파%부명%장자궤%황보정%장지기%료위명
人成骨样细胞%IRAK-4%细胞凋亡%RNA干扰%基因沉默
人成骨樣細胞%IRAK-4%細胞凋亡%RNA榦擾%基因沉默
인성골양세포%IRAK-4%세포조망%RNA간우%기인침묵
human osteoblast-like cell%IRAK-4%apoptosis%RNA interference%gene silence
[目的]研究siRNA沉默白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)基因对人成骨样细胞株MG63凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响.[方法]以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞(CON组:不加入任何转染试剂;SC组:以scrambled siRNA序列进行转染;KD组:以特异性IRAK-4-siRNA序列进行转染),应用流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡水平,western blotting检测Bcl-2、Bax基因的表达.[结果]与对照组相比,靶基因沉默组(KD组)细胞的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低;转染48h后,KD组细胞增殖变缓,凋亡增加,Bcl-2蛋白的表达明显下调且Bcl-2/BaxSC>Bcl-2/BaxKD;Spearman等级相关分析显示MG63细胞凋亡比例与Bcl-2/Bax的比值间有显著的相关性.[结论]siRNA沉默IRAK-4基因能够诱导人成骨样细胞株MG63凋亡,且靶细胞凋亡水平与Bcl-2、Bax基因表达水平的比值相关.
[目的]研究siRNA沉默白細胞介素-1受體相關激酶-4(IRAK-4)基因對人成骨樣細胞株MG63凋亡及凋亡相關基因Bcl-2、Bax錶達的影響.[方法]以Lipofectamine 2000為載體將IRAK-4-siRNA轉染入MG63細胞(CON組:不加入任何轉染試劑;SC組:以scrambled siRNA序列進行轉染;KD組:以特異性IRAK-4-siRNA序列進行轉染),應用流式細胞術及TUNEL法檢測細胞凋亡水平,western blotting檢測Bcl-2、Bax基因的錶達.[結果]與對照組相比,靶基因沉默組(KD組)細胞的IRAK-4 mRNA及蛋白錶達水平顯著降低;轉染48h後,KD組細胞增殖變緩,凋亡增加,Bcl-2蛋白的錶達明顯下調且Bcl-2/BaxSC>Bcl-2/BaxKD;Spearman等級相關分析顯示MG63細胞凋亡比例與Bcl-2/Bax的比值間有顯著的相關性.[結論]siRNA沉默IRAK-4基因能夠誘導人成骨樣細胞株MG63凋亡,且靶細胞凋亡水平與Bcl-2、Bax基因錶達水平的比值相關.
[목적]연구siRNA침묵백세포개소-1수체상관격매-4(IRAK-4)기인대인성골양세포주MG63조망급조망상관기인Bcl-2、Bax표체적영향.[방법]이Lipofectamine 2000위재체장IRAK-4-siRNA전염입MG63세포(CON조:불가입임하전염시제;SC조:이scrambled siRNA서렬진행전염;KD조:이특이성IRAK-4-siRNA서렬진행전염),응용류식세포술급TUNEL법검측세포조망수평,western blotting검측Bcl-2、Bax기인적표체.[결과]여대조조상비,파기인침묵조(KD조)세포적IRAK-4 mRNA급단백표체수평현저강저;전염48h후,KD조세포증식변완,조망증가,Bcl-2단백적표체명현하조차Bcl-2/BaxSC>Bcl-2/BaxKD;Spearman등급상관분석현시MG63세포조망비례여Bcl-2/Bax적비치간유현저적상관성.[결론]siRNA침묵IRAK-4기인능구유도인성골양세포주MG63조망,차파세포조망수평여Bcl-2、Bax기인표체수평적비치상관.