植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2013年
5期
128-133,157
,共7页
徐明%桂月晶%祁伟彦%柳少燕%陈捷胤%戴小枫
徐明%桂月晶%祁偉彥%柳少燕%陳捷胤%戴小楓
서명%계월정%기위언%류소연%진첩윤%대소풍
大丽轮枝菌%绿色荧光蛋白%农杆菌介导法%激发荧光
大麗輪枝菌%綠色熒光蛋白%農桿菌介導法%激髮熒光
대려륜지균%록색형광단백%농간균개도법%격발형광
Verticillium dahliae%green fluorescent protein (GFP)%Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation%excited fluorescence
以携带有潮霉素抗性筛选标记的pCTHyg载体为骨架,构建了含有增强型绿色荧光蛋白基因sGFP的载体pCH sGFP,并通过农杆菌介导的遗传转化法导入引起棉花黄萎病的高致病力大丽轮枝菌Vd991,获得了sGFP整合到大丽轮枝菌基因组的转化株.通过转化子荧光信号、生长表型和致病力筛选鉴定,获得了1株与Vd991生长和致病力无显著差异且荧光信号强烈的转化株Vd-gfp77.侵染棉花根部试验表明,Vd-gfp77侵染棉花后快速扩展繁殖,子代仍然能发出强烈的荧光信号.本试验绿色荧光蛋白标记大丽轮枝菌的成功构建,为后续大丽轮枝菌侵染棉花过程的组织学和致病机理研究提供了良好的研究材料.
以攜帶有潮黴素抗性篩選標記的pCTHyg載體為骨架,構建瞭含有增彊型綠色熒光蛋白基因sGFP的載體pCH sGFP,併通過農桿菌介導的遺傳轉化法導入引起棉花黃萎病的高緻病力大麗輪枝菌Vd991,穫得瞭sGFP整閤到大麗輪枝菌基因組的轉化株.通過轉化子熒光信號、生長錶型和緻病力篩選鑒定,穫得瞭1株與Vd991生長和緻病力無顯著差異且熒光信號彊烈的轉化株Vd-gfp77.侵染棉花根部試驗錶明,Vd-gfp77侵染棉花後快速擴展繁殖,子代仍然能髮齣彊烈的熒光信號.本試驗綠色熒光蛋白標記大麗輪枝菌的成功構建,為後續大麗輪枝菌侵染棉花過程的組織學和緻病機理研究提供瞭良好的研究材料.
이휴대유조매소항성사선표기적pCTHyg재체위골가,구건료함유증강형록색형광단백기인sGFP적재체pCH sGFP,병통과농간균개도적유전전화법도입인기면화황위병적고치병력대려륜지균Vd991,획득료sGFP정합도대려륜지균기인조적전화주.통과전화자형광신호、생장표형화치병력사선감정,획득료1주여Vd991생장화치병력무현저차이차형광신호강렬적전화주Vd-gfp77.침염면화근부시험표명,Vd-gfp77침염면화후쾌속확전번식,자대잉연능발출강렬적형광신호.본시험록색형광단백표기대려륜지균적성공구건,위후속대려륜지균침염면화과정적조직학화치병궤리연구제공료량호적연구재료.