中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2014年
3期
312-317
,共6页
卢颖%王阳%段思%王爽%朱辰杰%李淑华%张佩
盧穎%王暘%段思%王爽%硃辰傑%李淑華%張珮
로영%왕양%단사%왕상%주신걸%리숙화%장패
△Np73%MDA-MB-231%RNA干扰%基因沉默%乳腺癌
△Np73%MDA-MB-231%RNA榦擾%基因沉默%乳腺癌
△Np73%MDA-MB-231%RNA간우%기인침묵%유선암
△Np73%MDA-MB-231%RNA interference%Gene silencing%Breast cancer
目的:探讨靶向△Np73的小干扰RNA表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对其增殖和凋亡活性的影响.方法:构建△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;实时荧光定量PCR检测细胞转染质粒后△Np73和TAp73 mRNA的表达;共转染pcDNA3-HA/DNp73α表达质粒与△Np73小干扰质粒,Western blot检测细胞转染后△Np73和TAp73表达;CCK-8法检测转染质粒后细胞生长抑制率;caspase 3活性分光光度法检测转染质粒并应用阿霉素处理后细胞的凋亡水平.结果:成功构建并转染△Np73小干扰表达质粒,转染效率达60％.△Np73小干扰质粒转染细胞能有效抑制内源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白表达,对TAp73无显著抑制作用.经△Np73质粒干扰的细胞增殖活性显著下降,与空白对照组相比差异显著,阿霉素诱导△Np73质粒转染细胞凋亡水平增加,与阴性对照组相比有显著差异.结论:△Np73小干扰RNA表达质粒能显著降低MDA-MB-231细胞中△Np73 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞生长增殖,增强其被阿霉素诱导的凋亡水平,表明靶向沉默△Np73可能为未来人乳腺癌的治疗提供了一个新的策略.
目的:探討靶嚮△Np73的小榦擾RNA錶達質粒轉染人乳腺癌細胞株MDA-MB-231對其增殖和凋亡活性的影響.方法:構建△Np73小榦擾錶達質粒,脂質體法轉染人乳腺癌細胞株MDA-MB-231;熒光顯微鏡下觀察轉染細胞綠色熒光蛋白錶達,計算轉染效率;實時熒光定量PCR檢測細胞轉染質粒後△Np73和TAp73 mRNA的錶達;共轉染pcDNA3-HA/DNp73α錶達質粒與△Np73小榦擾質粒,Western blot檢測細胞轉染後△Np73和TAp73錶達;CCK-8法檢測轉染質粒後細胞生長抑製率;caspase 3活性分光光度法檢測轉染質粒併應用阿黴素處理後細胞的凋亡水平.結果:成功構建併轉染△Np73小榦擾錶達質粒,轉染效率達60％.△Np73小榦擾質粒轉染細胞能有效抑製內源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白錶達,對TAp73無顯著抑製作用.經△Np73質粒榦擾的細胞增殖活性顯著下降,與空白對照組相比差異顯著,阿黴素誘導△Np73質粒轉染細胞凋亡水平增加,與陰性對照組相比有顯著差異.結論:△Np73小榦擾RNA錶達質粒能顯著降低MDA-MB-231細胞中△Np73 mRNA及蛋白的錶達,抑製細胞生長增殖,增彊其被阿黴素誘導的凋亡水平,錶明靶嚮沉默△Np73可能為未來人乳腺癌的治療提供瞭一箇新的策略.
목적:탐토파향△Np73적소간우RNA표체질립전염인유선암세포주MDA-MB-231대기증식화조망활성적영향.방법:구건△Np73소간우표체질립,지질체법전염인유선암세포주MDA-MB-231;형광현미경하관찰전염세포록색형광단백표체,계산전염효솔;실시형광정량PCR검측세포전염질립후△Np73화TAp73 mRNA적표체;공전염pcDNA3-HA/DNp73α표체질립여△Np73소간우질립,Western blot검측세포전염후△Np73화TAp73표체;CCK-8법검측전염질립후세포생장억제솔;caspase 3활성분광광도법검측전염질립병응용아매소처리후세포적조망수평.결과:성공구건병전염△Np73소간우표체질립,전염효솔체60％.△Np73소간우질립전염세포능유효억제내원성△Np73 mRNA화외원성△Np73단백표체,대TAp73무현저억제작용.경△Np73질립간우적세포증식활성현저하강,여공백대조조상비차이현저,아매소유도△Np73질립전염세포조망수평증가,여음성대조조상비유현저차이.결론:△Np73소간우RNA표체질립능현저강저MDA-MB-231세포중△Np73 mRNA급단백적표체,억제세포생장증식,증강기피아매소유도적조망수평,표명파향침묵△Np73가능위미래인유선암적치료제공료일개신적책략.
