植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2013年
4期
362-367
,共6页
王亚娇%任堂雨%刘艳%王锡锋
王亞嬌%任堂雨%劉豔%王錫鋒
왕아교%임당우%류염%왕석봉
小麦矮缩病毒%原核表达%多克隆抗体%Western blot%免疫荧光标记
小麥矮縮病毒%原覈錶達%多剋隆抗體%Western blot%免疫熒光標記
소맥왜축병독%원핵표체%다극륭항체%Western blot%면역형광표기
Wheat dwarf virus%prokaryotic expression%polyclonal antibody%Western blot%immunofluorescence
小麦矮缩病毒(Wheat dwarf virus,WDV)引起的小麦矮缩病是近年来我国小麦生产中的一种重要病毒病害,急需研发快速精准的检测技术用于预测预报和病毒-介体相互作用的研究.本研究应用Gateway重组技术构建了外壳蛋白基因(Coat protein,cP)的原核表达载体,将重组表达载体转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导获得CP基因原核表达蛋白.以重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备得到了相应的抗体,Western blot检测表明制备的抗体能与CP重组蛋白、感病小麦和带毒叶蝉特异性结合,说明获得的抗体特异性高.用获得的抗体进行免疫荧光标记,观察到病毒分布在介体叶蝉的前中肠和中中肠部位,为WDV的预测预报和介体条沙叶蝉传毒机制的研究奠定了基础.
小麥矮縮病毒(Wheat dwarf virus,WDV)引起的小麥矮縮病是近年來我國小麥生產中的一種重要病毒病害,急需研髮快速精準的檢測技術用于預測預報和病毒-介體相互作用的研究.本研究應用Gateway重組技術構建瞭外殼蛋白基因(Coat protein,cP)的原覈錶達載體,將重組錶達載體轉化大腸桿菌Rosetta,經IPTG誘導穫得CP基因原覈錶達蛋白.以重組蛋白為抗原免疫新西蘭大白兔製備得到瞭相應的抗體,Western blot檢測錶明製備的抗體能與CP重組蛋白、感病小麥和帶毒葉蟬特異性結閤,說明穫得的抗體特異性高.用穫得的抗體進行免疫熒光標記,觀察到病毒分佈在介體葉蟬的前中腸和中中腸部位,為WDV的預測預報和介體條沙葉蟬傳毒機製的研究奠定瞭基礎.
소맥왜축병독(Wheat dwarf virus,WDV)인기적소맥왜축병시근년래아국소맥생산중적일충중요병독병해,급수연발쾌속정준적검측기술용우예측예보화병독-개체상호작용적연구.본연구응용Gateway중조기술구건료외각단백기인(Coat protein,cP)적원핵표체재체,장중조표체재체전화대장간균Rosetta,경IPTG유도획득CP기인원핵표체단백.이중조단백위항원면역신서란대백토제비득도료상응적항체,Western blot검측표명제비적항체능여CP중조단백、감병소맥화대독협선특이성결합,설명획득적항체특이성고.용획득적항체진행면역형광표기,관찰도병독분포재개체협선적전중장화중중장부위,위WDV적예측예보화개체조사협선전독궤제적연구전정료기출.
