解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
4期
492-497
,共6页
奥曲肽%ZAC%胃癌细胞%增殖%RNA干扰%免疫印迹法
奧麯肽%ZAC%胃癌細胞%增殖%RNA榦擾%免疫印跡法
오곡태%ZAC%위암세포%증식%RNA간우%면역인적법
Octreotide%ZAC%Gastric cancer cell%Proliferation%RNA interference%Western blotting
目的 探讨ZAC基因在生长抑素类似物奥曲肽(OCT)抑制胃癌细胞增殖通路的作用.方法 分别以不同浓度OCT处理胃癌细胞BGC823和SGC7901不同时间,MTT法筛选其增殖抑制的有效条件.OCT处理胃癌细胞(有效浓度/不同时间,有效时间/不同浓度),Western blotting检测OCT对胃癌细胞ZAC基因的效应.设计3条ZAC基因RNA干扰片段,分别插入pSUPER-EGFP-Ⅰ载体,构建3个ZAC-shRNA表达载体(pSUPER-EGFP-ZAC/1、pSUPER-EGFP-ZAC/2和pSUPER-EGFP-ZAC/3).经酶切和序列分析鉴定后,分别转染胃癌细胞BGC823和SGC7901.经G418筛选,RT-PCR鉴定,建立ZAC基因敲低(knock-down)的胃癌细胞系.以有效条件OCT孵育胃癌细胞(对照组)和ZAC基因敲低胃癌细胞(实验组),MTT法检测OCT对胃癌细胞的生长抑制效应.结果 OCT抑制胃癌细胞增殖的有效条件为10nmol/L孵育24h;OCT以时间和浓度依赖的方式诱导胃癌细胞ZAC基因表达.酶切及序列分析鉴定表明ZAC-shRNA表达载体构建成功.转染shRNA-ZAC/2的胃癌细胞,其ZAC mRNA水平明显降低(P＜0.05),为ZAC基因敲低胃癌细胞.ZAC基因敲低胃癌细胞的增殖明显高于对应的BGC823细胞和SGC7901细胞(P＜0.05).OCT孵育后,BGC823细胞和SGC7901细胞的增殖明显降低(P＜0.05).然而,ZAC基因敲低胃癌细胞的增殖无明显改变(P＞0.05).结论 OCT以时间和浓度依赖的方式诱导胃癌细胞ZAC基因表达;ZAC基因在OCT抑制胃癌细胞增殖通路中具有重要作用.
目的 探討ZAC基因在生長抑素類似物奧麯肽(OCT)抑製胃癌細胞增殖通路的作用.方法 分彆以不同濃度OCT處理胃癌細胞BGC823和SGC7901不同時間,MTT法篩選其增殖抑製的有效條件.OCT處理胃癌細胞(有效濃度/不同時間,有效時間/不同濃度),Western blotting檢測OCT對胃癌細胞ZAC基因的效應.設計3條ZAC基因RNA榦擾片段,分彆插入pSUPER-EGFP-Ⅰ載體,構建3箇ZAC-shRNA錶達載體(pSUPER-EGFP-ZAC/1、pSUPER-EGFP-ZAC/2和pSUPER-EGFP-ZAC/3).經酶切和序列分析鑒定後,分彆轉染胃癌細胞BGC823和SGC7901.經G418篩選,RT-PCR鑒定,建立ZAC基因敲低(knock-down)的胃癌細胞繫.以有效條件OCT孵育胃癌細胞(對照組)和ZAC基因敲低胃癌細胞(實驗組),MTT法檢測OCT對胃癌細胞的生長抑製效應.結果 OCT抑製胃癌細胞增殖的有效條件為10nmol/L孵育24h;OCT以時間和濃度依賴的方式誘導胃癌細胞ZAC基因錶達.酶切及序列分析鑒定錶明ZAC-shRNA錶達載體構建成功.轉染shRNA-ZAC/2的胃癌細胞,其ZAC mRNA水平明顯降低(P＜0.05),為ZAC基因敲低胃癌細胞.ZAC基因敲低胃癌細胞的增殖明顯高于對應的BGC823細胞和SGC7901細胞(P＜0.05).OCT孵育後,BGC823細胞和SGC7901細胞的增殖明顯降低(P＜0.05).然而,ZAC基因敲低胃癌細胞的增殖無明顯改變(P＞0.05).結論 OCT以時間和濃度依賴的方式誘導胃癌細胞ZAC基因錶達;ZAC基因在OCT抑製胃癌細胞增殖通路中具有重要作用.
목적 탐토ZAC기인재생장억소유사물오곡태(OCT)억제위암세포증식통로적작용.방법 분별이불동농도OCT처리위암세포BGC823화SGC7901불동시간,MTT법사선기증식억제적유효조건.OCT처리위암세포(유효농도/불동시간,유효시간/불동농도),Western blotting검측OCT대위암세포ZAC기인적효응.설계3조ZAC기인RNA간우편단,분별삽입pSUPER-EGFP-Ⅰ재체,구건3개ZAC-shRNA표체재체(pSUPER-EGFP-ZAC/1、pSUPER-EGFP-ZAC/2화pSUPER-EGFP-ZAC/3).경매절화서렬분석감정후,분별전염위암세포BGC823화SGC7901.경G418사선,RT-PCR감정,건립ZAC기인고저(knock-down)적위암세포계.이유효조건OCT부육위암세포(대조조)화ZAC기인고저위암세포(실험조),MTT법검측OCT대위암세포적생장억제효응.결과 OCT억제위암세포증식적유효조건위10nmol/L부육24h;OCT이시간화농도의뢰적방식유도위암세포ZAC기인표체.매절급서렬분석감정표명ZAC-shRNA표체재체구건성공.전염shRNA-ZAC/2적위암세포,기ZAC mRNA수평명현강저(P＜0.05),위ZAC기인고저위암세포.ZAC기인고저위암세포적증식명현고우대응적BGC823세포화SGC7901세포(P＜0.05).OCT부육후,BGC823세포화SGC7901세포적증식명현강저(P＜0.05).연이,ZAC기인고저위암세포적증식무명현개변(P＞0.05).결론 OCT이시간화농도의뢰적방식유도위암세포ZAC기인표체;ZAC기인재OCT억제위암세포증식통로중구유중요작용.
