植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2013年
5期
486-494
,共9页
冯浩%黄雪玲%王晓敏%李华一%康振生
馮浩%黃雪玲%王曉敏%李華一%康振生
풍호%황설령%왕효민%리화일%강진생
小麦%EF手钙离子绑定蛋白%amiRNA%VIGS%功能
小麥%EF手鈣離子綁定蛋白%amiRNA%VIGS%功能
소맥%EF수개리자방정단백%amiRNA%VIGS%공능
wheat%EF-hand binding protein%amiRNA%VIGS%function
根据小麦EF手钙离子绑定蛋白(TaCab1)基因序列,利用WMD3软件设计特异的人工mRNA(amiRNA),构建VIGS沉默载体.利用amiRNA-VIGS体系,对小麦的TaCab1基因的功能进行了初步分析.利用Northern blot和实时定量PCR技术分别检测了amiRNA的积累及TaCab1的沉默效率,并利用显微观察技术统计条锈菌侵染小麦后的组织学差异.结果表明,amiRNA可以得到有效的积累,其靶标基因TaCab1可以得到有效的沉默.从表型上看,小麦叶片上条锈菌夏孢子的产孢量也在一定程度上有所降低.组织学观察发现当TaCab1被沉默后,寄主细胞的坏死面积在侵染后期明显增大,条锈菌的菌丝分枝数也明显增多,但菌丝长度明显变短.
根據小麥EF手鈣離子綁定蛋白(TaCab1)基因序列,利用WMD3軟件設計特異的人工mRNA(amiRNA),構建VIGS沉默載體.利用amiRNA-VIGS體繫,對小麥的TaCab1基因的功能進行瞭初步分析.利用Northern blot和實時定量PCR技術分彆檢測瞭amiRNA的積纍及TaCab1的沉默效率,併利用顯微觀察技術統計條鏽菌侵染小麥後的組織學差異.結果錶明,amiRNA可以得到有效的積纍,其靶標基因TaCab1可以得到有效的沉默.從錶型上看,小麥葉片上條鏽菌夏孢子的產孢量也在一定程度上有所降低.組織學觀察髮現噹TaCab1被沉默後,寄主細胞的壞死麵積在侵染後期明顯增大,條鏽菌的菌絲分枝數也明顯增多,但菌絲長度明顯變短.
근거소맥EF수개리자방정단백(TaCab1)기인서렬,이용WMD3연건설계특이적인공mRNA(amiRNA),구건VIGS침묵재체.이용amiRNA-VIGS체계,대소맥적TaCab1기인적공능진행료초보분석.이용Northern blot화실시정량PCR기술분별검측료amiRNA적적루급TaCab1적침묵효솔,병이용현미관찰기술통계조수균침염소맥후적조직학차이.결과표명,amiRNA가이득도유효적적루,기파표기인TaCab1가이득도유효적침묵.종표형상간,소맥협편상조수균하포자적산포량야재일정정도상유소강저.조직학관찰발현당TaCab1피침묵후,기주세포적배사면적재침염후기명현증대,조수균적균사분지수야명현증다,단균사장도명현변단.
