草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2012年
6期
1143-1149
,共7页
刘文婷%刘永红%何蔚娟%段琦梅%权悠
劉文婷%劉永紅%何蔚娟%段琦梅%權悠
류문정%류영홍%하위연%단기매%권유
脱落酸%子叶期体细胞胚%干燥%种质保藏%转基因苜蓿
脫落痠%子葉期體細胞胚%榦燥%種質保藏%轉基因苜蓿
탈락산%자협기체세포배%간조%충질보장%전기인목숙
为探明干化的体细胞胚作为转基因苜蓿(Medicago sativa)人工种子的可行性,采用农杆菌菌株GV3101感染苜蓿叶柄的遗传转化方法,获得转化苜蓿植株并诱导转化出苜蓿植株的体细胞胚.将成熟的子叶期体细胞胚先置于含10 mM脱落酸的胚形成培养基BOi2Y中培养14d,然后将胚置于一系列的6种干燥剂中缓慢干燥7d,最后将胚转到1/2MSO萌发培养基中,直到茎叶萌发和根形成.分析不同转基因株系干化人工种子的萌发率和再生植株中的GUS表达,并利用Southern杂交分析转基因干化人工种子再生植株的遗传变异.结果表明:干化后的转基因人工种子萌发率达到74.3％,产生的植株从形态上相似于没有干化处理的体细胞胚再生植株.在随机的3个转基因株系中,Southern杂交结果表明再生植株仍能稳定表达GUS,每个株系基因整合位点一致.因此,干化体细胞胚用作转基因植物种质保藏的方法是有效可行的.
為探明榦化的體細胞胚作為轉基因苜蓿(Medicago sativa)人工種子的可行性,採用農桿菌菌株GV3101感染苜蓿葉柄的遺傳轉化方法,穫得轉化苜蓿植株併誘導轉化齣苜蓿植株的體細胞胚.將成熟的子葉期體細胞胚先置于含10 mM脫落痠的胚形成培養基BOi2Y中培養14d,然後將胚置于一繫列的6種榦燥劑中緩慢榦燥7d,最後將胚轉到1/2MSO萌髮培養基中,直到莖葉萌髮和根形成.分析不同轉基因株繫榦化人工種子的萌髮率和再生植株中的GUS錶達,併利用Southern雜交分析轉基因榦化人工種子再生植株的遺傳變異.結果錶明:榦化後的轉基因人工種子萌髮率達到74.3％,產生的植株從形態上相似于沒有榦化處理的體細胞胚再生植株.在隨機的3箇轉基因株繫中,Southern雜交結果錶明再生植株仍能穩定錶達GUS,每箇株繫基因整閤位點一緻.因此,榦化體細胞胚用作轉基因植物種質保藏的方法是有效可行的.
위탐명간화적체세포배작위전기인목숙(Medicago sativa)인공충자적가행성,채용농간균균주GV3101감염목숙협병적유전전화방법,획득전화목숙식주병유도전화출목숙식주적체세포배.장성숙적자협기체세포배선치우함10 mM탈락산적배형성배양기BOi2Y중배양14d,연후장배치우일계렬적6충간조제중완만간조7d,최후장배전도1/2MSO맹발배양기중,직도경협맹발화근형성.분석불동전기인주계간화인공충자적맹발솔화재생식주중적GUS표체,병이용Southern잡교분석전기인간화인공충자재생식주적유전변이.결과표명:간화후적전기인인공충자맹발솔체도74.3％,산생적식주종형태상상사우몰유간화처리적체세포배재생식주.재수궤적3개전기인주계중,Southern잡교결과표명재생식주잉능은정표체GUS,매개주계기인정합위점일치.인차,간화체세포배용작전기인식물충질보장적방법시유효가행적.
