草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2013年
1期
167-173
,共7页
芒属%ISSR%PCR反应体系%优化
芒屬%ISSR%PCR反應體繫%優化
망속%ISSR%PCR반응체계%우화
芒属植物(Miscanthus)被认为适合作为新一代能源作物开发利用而成为当前国内外研究热点之一.为给后续相关研究奠定基础,本研究从中国芒属植物的芒(Miscanthus sinensis)、五节芒(M.floridulus)、荻(M.sacchari florus)、南荻(M.lutarioriparius)、尼泊尔芒(M.nepalensis)、双药芒(M.nudipes)和红山茅(M.paniculatus)等类群中挑取部分材料,以其基因组DNA为模板,采用同一试验考察多个因素及水平的筛选方式对ISSR-PCR扩增体系中的Mg2+、dNTP、引物、模板的浓度以及循环数进行优化,建立适用于中国芒属植物的最佳ISSR-PCR反应体系.该体系为20 μL,含Mg2+2.5 mmol·L-1,dNTP 0.25 mmol·L-1,引物0.5 μmol·L-1,DNA 2 μL及1 UTaq Plus DNA聚合酶和1×PCR buffer.结果将为进一步开展中国芒属植物的相关遗传分析研究提供技术参考.
芒屬植物(Miscanthus)被認為適閤作為新一代能源作物開髮利用而成為噹前國內外研究熱點之一.為給後續相關研究奠定基礎,本研究從中國芒屬植物的芒(Miscanthus sinensis)、五節芒(M.floridulus)、荻(M.sacchari florus)、南荻(M.lutarioriparius)、尼泊爾芒(M.nepalensis)、雙藥芒(M.nudipes)和紅山茅(M.paniculatus)等類群中挑取部分材料,以其基因組DNA為模闆,採用同一試驗攷察多箇因素及水平的篩選方式對ISSR-PCR擴增體繫中的Mg2+、dNTP、引物、模闆的濃度以及循環數進行優化,建立適用于中國芒屬植物的最佳ISSR-PCR反應體繫.該體繫為20 μL,含Mg2+2.5 mmol·L-1,dNTP 0.25 mmol·L-1,引物0.5 μmol·L-1,DNA 2 μL及1 UTaq Plus DNA聚閤酶和1×PCR buffer.結果將為進一步開展中國芒屬植物的相關遺傳分析研究提供技術參攷.
망속식물(Miscanthus)피인위괄합작위신일대능원작물개발이용이성위당전국내외연구열점지일.위급후속상관연구전정기출,본연구종중국망속식물적망(Miscanthus sinensis)、오절망(M.floridulus)、적(M.sacchari florus)、남적(M.lutarioriparius)、니박이망(M.nepalensis)、쌍약망(M.nudipes)화홍산모(M.paniculatus)등류군중도취부분재료,이기기인조DNA위모판,채용동일시험고찰다개인소급수평적사선방식대ISSR-PCR확증체계중적Mg2+、dNTP、인물、모판적농도이급순배수진행우화,건립괄용우중국망속식물적최가ISSR-PCR반응체계.해체계위20 μL,함Mg2+2.5 mmol·L-1,dNTP 0.25 mmol·L-1,인물0.5 μmol·L-1,DNA 2 μL급1 UTaq Plus DNA취합매화1×PCR buffer.결과장위진일보개전중국망속식물적상관유전분석연구제공기술삼고.