生物骨科材料与临床研究
生物骨科材料與臨床研究
생물골과재료여림상연구
ORTHOPAEDIC BIOMECHANICS MATERIALS AND CLINICAL STUDY
2014年
2期
53-57,后插2
,共6页
李晋玉%徐林%谭荣伟%金合%李志勇%俞兴
李晉玉%徐林%譚榮偉%金閤%李誌勇%俞興
리진옥%서림%담영위%금합%리지용%유흥
骨碎补总黄酮%MC3T3-E1细胞%海藻酸基可注射骨修复%四甲基偶氮唑盐比色法%体外细胞实验
骨碎補總黃酮%MC3T3-E1細胞%海藻痠基可註射骨脩複%四甲基偶氮唑鹽比色法%體外細胞實驗
골쇄보총황동%MC3T3-E1세포%해조산기가주사골수복%사갑기우담서염비색법%체외세포실험
MC3T3-E1%Alginate-based injectable bone repair materials%Assemble Flavone of Drynaria Rhizome (AFDR)%In vitro experiments%MTT
目的 本实验旨在观察中药骨碎补提取物骨碎补总黄酮(AFDR)复合海藻酸基可注射骨修复材料对成骨细胞MC3T3-E1体外培养的影响.方法 将成骨细胞株MC3T3-E1随机分为空白对照组、单纯使用海藻酸基可注射骨修复材料组、AFDR0.04mg/L、0.16mg/L、0.64mg/L、1.28mg/L、5.12mg/L7组,体外复合海藻酸基可注射骨修复材料,以24h和48h为观察时间点,倒置显微镜观察MC3T3-E1细胞形态,台盼蓝拒染法检测MC3T3-E1存活率,MTT法观察细胞增殖效应,碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素定量检测分别观察不同浓度骨碎补总黄酮促进MC3T3-E1分化作用,采用Von kossa钙化染色法观察其促MC3T3-E1细胞钙化作用.结果 ①倒置显微镜下观察复合海藻酸基可注射骨修复材料的MC3T3-E1细胞形态,细胞形态呈三角形、多边形、长梭形等,呈集落样生长,无接触抑制,有伪足伸出,胞液透亮,核圆形.AFDR各组不同程度促进成骨细胞的增殖、分化:7组能不同程度的促进成骨细胞的增殖、分化,与空白对照组比较,以0.16mg/L和0.64mg/L剂量组的成骨细胞增殖数量最多,1.28mg/L,5.12mg/L的AFDR对细胞增殖作用不明显;②MC3T3-E1平均存活率≥90％;③骨碎补总黄酮(AFDR) 0.16 mg/L和0.64mg/L剂量组在培养24小时和48小时,其OD值与空白对照组及组间均有显著性差异,可促进MC3T3-E1细胞增殖(P＜ 0.05和P＜0.01);④AFDR 0.16 mg/L和0.64mg/L剂量组能使MC3T3-E1的ALP活性升高(P＜0.05);⑤AFDR 0.64mg/L剂量组能促进MC3T3-E1骨钙素合成(P＜0.05);⑥AFDR 0.16 mg/L和0.64mg/L剂量组均可促进细胞钙化(P＜0.05).结论 AFDR可显著促进在海藻酸基可注射骨修复材料上MC3T3-E1的增殖、分化和钙化,其作用具有时间依赖和剂量依赖关系.
目的 本實驗旨在觀察中藥骨碎補提取物骨碎補總黃酮(AFDR)複閤海藻痠基可註射骨脩複材料對成骨細胞MC3T3-E1體外培養的影響.方法 將成骨細胞株MC3T3-E1隨機分為空白對照組、單純使用海藻痠基可註射骨脩複材料組、AFDR0.04mg/L、0.16mg/L、0.64mg/L、1.28mg/L、5.12mg/L7組,體外複閤海藻痠基可註射骨脩複材料,以24h和48h為觀察時間點,倒置顯微鏡觀察MC3T3-E1細胞形態,檯盼藍拒染法檢測MC3T3-E1存活率,MTT法觀察細胞增殖效應,堿性燐痠酶(ALP)活性和骨鈣素定量檢測分彆觀察不同濃度骨碎補總黃酮促進MC3T3-E1分化作用,採用Von kossa鈣化染色法觀察其促MC3T3-E1細胞鈣化作用.結果 ①倒置顯微鏡下觀察複閤海藻痠基可註射骨脩複材料的MC3T3-E1細胞形態,細胞形態呈三角形、多邊形、長梭形等,呈集落樣生長,無接觸抑製,有偽足伸齣,胞液透亮,覈圓形.AFDR各組不同程度促進成骨細胞的增殖、分化:7組能不同程度的促進成骨細胞的增殖、分化,與空白對照組比較,以0.16mg/L和0.64mg/L劑量組的成骨細胞增殖數量最多,1.28mg/L,5.12mg/L的AFDR對細胞增殖作用不明顯;②MC3T3-E1平均存活率≥90％;③骨碎補總黃酮(AFDR) 0.16 mg/L和0.64mg/L劑量組在培養24小時和48小時,其OD值與空白對照組及組間均有顯著性差異,可促進MC3T3-E1細胞增殖(P＜ 0.05和P＜0.01);④AFDR 0.16 mg/L和0.64mg/L劑量組能使MC3T3-E1的ALP活性升高(P＜0.05);⑤AFDR 0.64mg/L劑量組能促進MC3T3-E1骨鈣素閤成(P＜0.05);⑥AFDR 0.16 mg/L和0.64mg/L劑量組均可促進細胞鈣化(P＜0.05).結論 AFDR可顯著促進在海藻痠基可註射骨脩複材料上MC3T3-E1的增殖、分化和鈣化,其作用具有時間依賴和劑量依賴關繫.
목적 본실험지재관찰중약골쇄보제취물골쇄보총황동(AFDR)복합해조산기가주사골수복재료대성골세포MC3T3-E1체외배양적영향.방법 장성골세포주MC3T3-E1수궤분위공백대조조、단순사용해조산기가주사골수복재료조、AFDR0.04mg/L、0.16mg/L、0.64mg/L、1.28mg/L、5.12mg/L7조,체외복합해조산기가주사골수복재료,이24h화48h위관찰시간점,도치현미경관찰MC3T3-E1세포형태,태반람거염법검측MC3T3-E1존활솔,MTT법관찰세포증식효응,감성린산매(ALP)활성화골개소정량검측분별관찰불동농도골쇄보총황동촉진MC3T3-E1분화작용,채용Von kossa개화염색법관찰기촉MC3T3-E1세포개화작용.결과 ①도치현미경하관찰복합해조산기가주사골수복재료적MC3T3-E1세포형태,세포형태정삼각형、다변형、장사형등,정집락양생장,무접촉억제,유위족신출,포액투량,핵원형.AFDR각조불동정도촉진성골세포적증식、분화:7조능불동정도적촉진성골세포적증식、분화,여공백대조조비교,이0.16mg/L화0.64mg/L제량조적성골세포증식수량최다,1.28mg/L,5.12mg/L적AFDR대세포증식작용불명현;②MC3T3-E1평균존활솔≥90％;③골쇄보총황동(AFDR) 0.16 mg/L화0.64mg/L제량조재배양24소시화48소시,기OD치여공백대조조급조간균유현저성차이,가촉진MC3T3-E1세포증식(P＜ 0.05화P＜0.01);④AFDR 0.16 mg/L화0.64mg/L제량조능사MC3T3-E1적ALP활성승고(P＜0.05);⑤AFDR 0.64mg/L제량조능촉진MC3T3-E1골개소합성(P＜0.05);⑥AFDR 0.16 mg/L화0.64mg/L제량조균가촉진세포개화(P＜0.05).결론 AFDR가현저촉진재해조산기가주사골수복재료상MC3T3-E1적증식、분화화개화,기작용구유시간의뢰화제량의뢰관계.
