遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2014年
4期
360-368
,共9页
唐成程%张全军%李小平%樊娜娜%杨翌%全龙泉%赖良学
唐成程%張全軍%李小平%樊娜娜%楊翌%全龍泉%賴良學
당성정%장전군%리소평%번나나%양익%전룡천%뢰량학
类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)%家兔%CCR5基因%基因修饰
類轉錄激活因子效應物覈痠酶(TALEN)%傢兔%CCR5基因%基因脩飾
류전록격활인자효응물핵산매(TALEN)%가토%CCR5기인%기인수식
transcription activator-like effector nuclease (TALEN)%rabbit%CCR5%gene modification
缺少合适的能够被人免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)感染的动物模型是获得性免疫缺陷综合征/艾滋病(Acquired immunedeficiency syndrome,AIDS)疫苗和药物研发的瓶颈.HIV-1能在野生型兔子中形成持续感染,在共表达人CD4和CCR5的兔细胞系中,HIV-1能高效复制,并形成合胞体.若在家兔中高表达人CD4和CCR5,就可能获得研究AIDS的理想动物模型.文章采用高效基因打靶技术—类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN),探讨在家兔CCR5基因位点定点敲入人CD4和CCR5,获得能够感染HIV-1家兔模型的可能性.针对家兔CCR5基因,设计了两对TALENs和一个同源打靶载体,TALEN mRNAs和DNA同源片段显微注射到家兔受精卵中,体外培养3～5 d后,收集24枚胚胎,对胚胎的基因突变情况进行PCR和测序分析.结果显示,在家兔CCR5位点,24枚胚胎均发生了基因敲除,5枚胚胎还发生了人CD4和CCR5基因敲入.该结果为建立艾滋病研究新动物模型奠定了基础.
缺少閤適的能夠被人免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)感染的動物模型是穫得性免疫缺陷綜閤徵/艾滋病(Acquired immunedeficiency syndrome,AIDS)疫苗和藥物研髮的瓶頸.HIV-1能在野生型兔子中形成持續感染,在共錶達人CD4和CCR5的兔細胞繫中,HIV-1能高效複製,併形成閤胞體.若在傢兔中高錶達人CD4和CCR5,就可能穫得研究AIDS的理想動物模型.文章採用高效基因打靶技術—類轉錄激活因子效應物覈痠酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN),探討在傢兔CCR5基因位點定點敲入人CD4和CCR5,穫得能夠感染HIV-1傢兔模型的可能性.針對傢兔CCR5基因,設計瞭兩對TALENs和一箇同源打靶載體,TALEN mRNAs和DNA同源片段顯微註射到傢兔受精卵中,體外培養3～5 d後,收集24枚胚胎,對胚胎的基因突變情況進行PCR和測序分析.結果顯示,在傢兔CCR5位點,24枚胚胎均髮生瞭基因敲除,5枚胚胎還髮生瞭人CD4和CCR5基因敲入.該結果為建立艾滋病研究新動物模型奠定瞭基礎.
결소합괄적능구피인면역결함병독1형(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)감염적동물모형시획득성면역결함종합정/애자병(Acquired immunedeficiency syndrome,AIDS)역묘화약물연발적병경.HIV-1능재야생형토자중형성지속감염,재공표체인CD4화CCR5적토세포계중,HIV-1능고효복제,병형성합포체.약재가토중고표체인CD4화CCR5,취가능획득연구AIDS적이상동물모형.문장채용고효기인타파기술—류전록격활인자효응물핵산매(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN),탐토재가토CCR5기인위점정점고입인CD4화CCR5,획득능구감염HIV-1가토모형적가능성.침대가토CCR5기인,설계료량대TALENs화일개동원타파재체,TALEN mRNAs화DNA동원편단현미주사도가토수정란중,체외배양3～5 d후,수집24매배태,대배태적기인돌변정황진행PCR화측서분석.결과현시,재가토CCR5위점,24매배태균발생료기인고제,5매배태환발생료인CD4화CCR5기인고입.해결과위건립애자병연구신동물모형전정료기출.
