作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2014年
2期
253-263
,共11页
牛俊奇%王爱勤%黄静丽%杨丽涛%李杨瑞
牛俊奇%王愛勤%黃靜麗%楊麗濤%李楊瑞
우준기%왕애근%황정려%양려도%리양서
甘蔗%中性/碱性转化酶%启动子%克隆%基因表达
甘蔗%中性/堿性轉化酶%啟動子%剋隆%基因錶達
감자%중성/감성전화매%계동자%극륭%기인표체
Sugarcane%Alkaline/neutral invertase%Promoter%Cloning%Gene expression
中性/碱性转化酶(Alkaline/Neutral Invertasc)能不可逆地催化蔗糖分解为葡萄糖和果糖,在植物生长发育中起重要作用.本研究采用RT-PCR和RACE技术从甘蔗品种GT28心叶中克隆到甘蔗中性/碱性转化酶基因全长cDNA序列,基因命名为SoNIN1.该基因全长2289 bp (GenBank登录号为JX109944),开放阅读框为1812 bp,编码603个氨基酸,相对分子量为67.79 kD,等电点为6.41.具有中性/碱性转化酶保守结构域,N-端不含跨膜结构和信号肽.其编码氨基酸序列与玉米、水稻和黑麦草的亲缘关系较近,属于同一进化分支.利用染色体步移技术克隆到SoNIN1基因5’侧翼启动子序列,长度为1174 bp (GenBank登录号为KC854419).启动子序列含有多个CAAT-box和TATA-box等基本作用元件,参与分生组织特异性激活,参与干旱诱导的MYB结合位点,脱落酸、茉莉酸甲酯和赤霉素响应等作用元件.利用实时荧光定量PCR技术,在生理成熟期甘蔗茎、叶、花序和芽中均能检测到SoNIN1的表达,其表达量在叶中最高,芽中次之,而在+1节间最低.苗期根和叶中SoNIN1基因都受PEG和NaCl诱导表达.
中性/堿性轉化酶(Alkaline/Neutral Invertasc)能不可逆地催化蔗糖分解為葡萄糖和果糖,在植物生長髮育中起重要作用.本研究採用RT-PCR和RACE技術從甘蔗品種GT28心葉中剋隆到甘蔗中性/堿性轉化酶基因全長cDNA序列,基因命名為SoNIN1.該基因全長2289 bp (GenBank登錄號為JX109944),開放閱讀框為1812 bp,編碼603箇氨基痠,相對分子量為67.79 kD,等電點為6.41.具有中性/堿性轉化酶保守結構域,N-耑不含跨膜結構和信號肽.其編碼氨基痠序列與玉米、水稻和黑麥草的親緣關繫較近,屬于同一進化分支.利用染色體步移技術剋隆到SoNIN1基因5’側翼啟動子序列,長度為1174 bp (GenBank登錄號為KC854419).啟動子序列含有多箇CAAT-box和TATA-box等基本作用元件,參與分生組織特異性激活,參與榦旱誘導的MYB結閤位點,脫落痠、茉莉痠甲酯和赤黴素響應等作用元件.利用實時熒光定量PCR技術,在生理成熟期甘蔗莖、葉、花序和芽中均能檢測到SoNIN1的錶達,其錶達量在葉中最高,芽中次之,而在+1節間最低.苗期根和葉中SoNIN1基因都受PEG和NaCl誘導錶達.
중성/감성전화매(Alkaline/Neutral Invertasc)능불가역지최화자당분해위포도당화과당,재식물생장발육중기중요작용.본연구채용RT-PCR화RACE기술종감자품충GT28심협중극륭도감자중성/감성전화매기인전장cDNA서렬,기인명명위SoNIN1.해기인전장2289 bp (GenBank등록호위JX109944),개방열독광위1812 bp,편마603개안기산,상대분자량위67.79 kD,등전점위6.41.구유중성/감성전화매보수결구역,N-단불함과막결구화신호태.기편마안기산서렬여옥미、수도화흑맥초적친연관계교근,속우동일진화분지.이용염색체보이기술극륭도SoNIN1기인5’측익계동자서렬,장도위1174 bp (GenBank등록호위KC854419).계동자서렬함유다개CAAT-box화TATA-box등기본작용원건,삼여분생조직특이성격활,삼여간한유도적MYB결합위점,탈락산、말리산갑지화적매소향응등작용원건.이용실시형광정량PCR기술,재생리성숙기감자경、협、화서화아중균능검측도SoNIN1적표체,기표체량재협중최고,아중차지,이재+1절간최저.묘기근화협중SoNIN1기인도수PEG화NaCl유도표체.
