中国血液净化
中國血液淨化
중국혈액정화
CHINESE JOURNAL OF BLOOD PURIFICATION
2014年
4期
313-316
,共4页
张秀丽%鲁淑敏%赵越%马健飞%李德天%李红娟
張秀麗%魯淑敏%趙越%馬健飛%李德天%李紅娟
장수려%로숙민%조월%마건비%리덕천%리홍연
脂多糖%ZnSO4%凋亡%大鼠腹膜间皮细胞%腹膜透析
脂多糖%ZnSO4%凋亡%大鼠腹膜間皮細胞%腹膜透析
지다당%ZnSO4%조망%대서복막간피세포%복막투석
lipopolysaccharide%Zn%apoptosis%rat peritoneal mesothelial cells%peritoneal dialysis
目的 研究锌离子对脂多糖(LPS)诱导的大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)凋亡的影响及机制的探索,从而为锌离子在腹膜透析中的应用提供实验基础.方法 胰蛋白酶消化法培养原代大鼠腹膜间皮细胞、传代、经鉴定后分组:①对照组;②LPS组;③ZnSO4组;④ZnSO4/LPS组.应用AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测RPMC凋亡率,并采用Westen Blot方法检测细胞外信号调节激酶(P-ERK),BAX,凋亡诱导因子(AIF),天冬氨酸特异性半胧氨酸蛋白酶3(caspase3),天冬氨酸特异性半胧氨酸蛋白酶9 (caspase9)蛋白表达.应用流式细胞术,采用活性氧自由基(ROS)检测试剂盒检测各组别的ROS蛋白表达情况.结果 与对照组相比,LPS组RPMC凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白(BAX,AIF,caspase3,caspase9)表达升高(P＜0.01).与LPS组相比,ZnSO4作用组RPMC凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白表达明显降低(P＜0.01).LPS组ROS显著高于对照组而ZnSO4作用组ROS显著低于LPS组(P＜0.01,P＜0.01).与LPS组相比,ZnSO4作用组P-ERK的表达明显升高(P＜0.01).结论 ZnSO4可能可以逆转LPS所致的RPMC凋亡,对腹膜透析相关腹膜炎过程中所导致的RPMC损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过ERK通路而发挥作用.
目的 研究鋅離子對脂多糖(LPS)誘導的大鼠腹膜間皮細胞(RPMC)凋亡的影響及機製的探索,從而為鋅離子在腹膜透析中的應用提供實驗基礎.方法 胰蛋白酶消化法培養原代大鼠腹膜間皮細胞、傳代、經鑒定後分組:①對照組;②LPS組;③ZnSO4組;④ZnSO4/LPS組.應用AnnexinV-FITC凋亡檢測試劑盒及流式細胞儀檢測RPMC凋亡率,併採用Westen Blot方法檢測細胞外信號調節激酶(P-ERK),BAX,凋亡誘導因子(AIF),天鼕氨痠特異性半矓氨痠蛋白酶3(caspase3),天鼕氨痠特異性半矓氨痠蛋白酶9 (caspase9)蛋白錶達.應用流式細胞術,採用活性氧自由基(ROS)檢測試劑盒檢測各組彆的ROS蛋白錶達情況.結果 與對照組相比,LPS組RPMC凋亡細胞數量和相關凋亡蛋白(BAX,AIF,caspase3,caspase9)錶達升高(P＜0.01).與LPS組相比,ZnSO4作用組RPMC凋亡細胞數量和相關凋亡蛋白錶達明顯降低(P＜0.01).LPS組ROS顯著高于對照組而ZnSO4作用組ROS顯著低于LPS組(P＜0.01,P＜0.01).與LPS組相比,ZnSO4作用組P-ERK的錶達明顯升高(P＜0.01).結論 ZnSO4可能可以逆轉LPS所緻的RPMC凋亡,對腹膜透析相關腹膜炎過程中所導緻的RPMC損傷具有保護作用,其作用機製可能是通過ERK通路而髮揮作用.
목적 연구자리자대지다당(LPS)유도적대서복막간피세포(RPMC)조망적영향급궤제적탐색,종이위자리자재복막투석중적응용제공실험기출.방법 이단백매소화법배양원대대서복막간피세포、전대、경감정후분조:①대조조;②LPS조;③ZnSO4조;④ZnSO4/LPS조.응용AnnexinV-FITC조망검측시제합급류식세포의검측RPMC조망솔,병채용Westen Blot방법검측세포외신호조절격매(P-ERK),BAX,조망유도인자(AIF),천동안산특이성반롱안산단백매3(caspase3),천동안산특이성반롱안산단백매9 (caspase9)단백표체.응용류식세포술,채용활성양자유기(ROS)검측시제합검측각조별적ROS단백표체정황.결과 여대조조상비,LPS조RPMC조망세포수량화상관조망단백(BAX,AIF,caspase3,caspase9)표체승고(P＜0.01).여LPS조상비,ZnSO4작용조RPMC조망세포수량화상관조망단백표체명현강저(P＜0.01).LPS조ROS현저고우대조조이ZnSO4작용조ROS현저저우LPS조(P＜0.01,P＜0.01).여LPS조상비,ZnSO4작용조P-ERK적표체명현승고(P＜0.01).결론 ZnSO4가능가이역전LPS소치적RPMC조망,대복막투석상관복막염과정중소도치적RPMC손상구유보호작용,기작용궤제가능시통과ERK통로이발휘작용.
