四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2014年
1期
201-205
,共5页
于春雷%田平平%吴传芳%欧阳劲%秦岭
于春雷%田平平%吳傳芳%歐暘勁%秦嶺
우춘뢰%전평평%오전방%구양경%진령
Star-PAP%U6 snRNA%TUTase%末端尿苷酸转移酶
Star-PAP%U6 snRNA%TUTase%末耑尿苷痠轉移酶
Star-PAP%U6 snRNA%TUTase%말단뇨감산전이매
Star-PAP%U6 snRNA%TUTase
克隆并构建了Star-PAP的表达载体,然后将该载体转染HEK293细胞,经纯化得到了重组的Star-PAP蛋白.以细胞总RNA和体外转录的U6 snRNA为底物,对纯化到的Star-PAP的TUTase活性进行了分析.结果显示重组的Star-PAP能够对细胞总RNA以及U6 snRNA进行体外尿苷化修饰,表明纯化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分离得到了具有U6 snRNA底物特异性的细胞核组分.该组分除了含有Star-PAP外,还含有一种未知蛋白,该未知蛋白可能就是赋予Star-PAP底物特异性的限定性因子.
剋隆併構建瞭Star-PAP的錶達載體,然後將該載體轉染HEK293細胞,經純化得到瞭重組的Star-PAP蛋白.以細胞總RNA和體外轉錄的U6 snRNA為底物,對純化到的Star-PAP的TUTase活性進行瞭分析.結果顯示重組的Star-PAP能夠對細胞總RNA以及U6 snRNA進行體外尿苷化脩飾,錶明純化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分離得到瞭具有U6 snRNA底物特異性的細胞覈組分.該組分除瞭含有Star-PAP外,還含有一種未知蛋白,該未知蛋白可能就是賦予Star-PAP底物特異性的限定性因子.
극륭병구건료Star-PAP적표체재체,연후장해재체전염HEK293세포,경순화득도료중조적Star-PAP단백.이세포총RNA화체외전록적U6 snRNA위저물,대순화도적Star-PAP적TUTase활성진행료분석.결과현시중조적Star-PAP능구대세포총RNA이급U6 snRNA진행체외뇨감화수식,표명순화도적Star-PAP구유량호적TUTase활성.차외,사용HPLC분리득도료구유U6 snRNA저물특이성적세포핵조분.해조분제료함유Star-PAP외,환함유일충미지단백,해미지단백가능취시부여Star-PAP저물특이성적한정성인자.
