南方水产科学
南方水產科學
남방수산과학
SOUTH CHINA FISHERIES SCIENCE
2014年
1期
35-42
,共8页
徐梦婷%傅明骏%黄建华%周发林%邱丽华%江世贵
徐夢婷%傅明駿%黃建華%週髮林%邱麗華%江世貴
서몽정%부명준%황건화%주발림%구려화%강세귀
斑节对虾%血淋巴%低丰度蛋白%蛋白质组
斑節對蝦%血淋巴%低豐度蛋白%蛋白質組
반절대하%혈림파%저봉도단백%단백질조
Penaeus monodon%haemolymph%low abundance protein%proteomics
文章探索并优化了斑节对虾(Penaeus monodon)血淋巴双向电泳技术体系,对斑节对虾血淋巴总蛋白抽提方法进行优化,减小高丰度蛋白的影响;对双向电泳过程各步骤,如IPG胶条pH范围的选择、等电聚焦程序、上样量等进行了优化,得到高分辨率的2-DE图谱,用PDQuest软件进行了初步分析.结果表明,用PEG 6000能更快捷有效地去除血淋巴中的高丰度蛋白,增加低丰度蛋白的点数及浓度;在抽提蛋白过程中,利用预冷的80％丙酮洗涤,在一向电泳过程中设置100 V低压除盐,能更有效地去除蛋白中的盐分;采用18 cm、pH 3 ～10NL的中型胶条,能更好地显示低丰度蛋白点的分布;被动水化上样300 μg结合硝酸银染色方法,能有效提高双向电泳图谱中蛋白点的分离度和分辨率.该试验为斑节对虾及其他甲壳动物血淋巴蛋白质组学相关研究提供了稳定可重复的研究方法.
文章探索併優化瞭斑節對蝦(Penaeus monodon)血淋巴雙嚮電泳技術體繫,對斑節對蝦血淋巴總蛋白抽提方法進行優化,減小高豐度蛋白的影響;對雙嚮電泳過程各步驟,如IPG膠條pH範圍的選擇、等電聚焦程序、上樣量等進行瞭優化,得到高分辨率的2-DE圖譜,用PDQuest軟件進行瞭初步分析.結果錶明,用PEG 6000能更快捷有效地去除血淋巴中的高豐度蛋白,增加低豐度蛋白的點數及濃度;在抽提蛋白過程中,利用預冷的80％丙酮洗滌,在一嚮電泳過程中設置100 V低壓除鹽,能更有效地去除蛋白中的鹽分;採用18 cm、pH 3 ～10NL的中型膠條,能更好地顯示低豐度蛋白點的分佈;被動水化上樣300 μg結閤硝痠銀染色方法,能有效提高雙嚮電泳圖譜中蛋白點的分離度和分辨率.該試驗為斑節對蝦及其他甲殼動物血淋巴蛋白質組學相關研究提供瞭穩定可重複的研究方法.
문장탐색병우화료반절대하(Penaeus monodon)혈림파쌍향전영기술체계,대반절대하혈림파총단백추제방법진행우화,감소고봉도단백적영향;대쌍향전영과정각보취,여IPG효조pH범위적선택、등전취초정서、상양량등진행료우화,득도고분변솔적2-DE도보,용PDQuest연건진행료초보분석.결과표명,용PEG 6000능경쾌첩유효지거제혈림파중적고봉도단백,증가저봉도단백적점수급농도;재추제단백과정중,이용예랭적80％병동세조,재일향전영과정중설치100 V저압제염,능경유효지거제단백중적염분;채용18 cm、pH 3 ～10NL적중형효조,능경호지현시저봉도단백점적분포;피동수화상양300 μg결합초산은염색방법,능유효제고쌍향전영도보중단백점적분리도화분변솔.해시험위반절대하급기타갑각동물혈림파단백질조학상관연구제공료은정가중복적연구방법.
