法医学杂志
法醫學雜誌
법의학잡지
JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE
2014年
1期
13-18
,共6页
季英磊%闫骏%王艳莎%刘夷嫦%谷振勇
季英磊%閆駿%王豔莎%劉夷嫦%穀振勇
계영뢰%염준%왕염사%류이항%곡진용
法医病理学%内质网%脂多糖类%肝细胞%细胞凋亡%大鼠
法醫病理學%內質網%脂多糖類%肝細胞%細胞凋亡%大鼠
법의병이학%내질망%지다당류%간세포%세포조망%대서
forensic pathology%endoplasmic reticulum%lipopolysaccharide%hepatocytes%apoptosis%rats
目的 探讨内质网应激在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝细胞凋亡中的作用. 方法 肝细胞系BRL细胞培养,用LPS、内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)、内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)分别或组合处理肝细胞.用MTT比色法检测细胞活力的变化,Heochst 33258荧光染色检测细胞凋亡形态的变化,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法检测内质网应激标志蛋白GRP78和内质网应激相关的凋亡蛋白CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的表达. 结果 LPS引起肝细胞活力降低、细胞凋亡率明显增加,并具有量效和时效关系,LPS诱导GRP78、CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的表达上调;TG可引起肝细胞活力降低和细胞凋亡增加,并能加重LPS引起的肝细胞损伤;4-PBA明显抑制LPS引起的肝细胞凋亡增加.结论 内质网应激参与介导了LPS引起的肝细胞凋亡,提示内质网应激是LPS诱导肝细胞损伤的重要发病途径.
目的 探討內質網應激在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導的肝細胞凋亡中的作用. 方法 肝細胞繫BRL細胞培養,用LPS、內質網應激誘導劑毒鬍蘿蔔素(thapsigargin,TG)、內質網應激抑製劑4-苯基丁痠(4-phenylbutyric acid,4-PBA)分彆或組閤處理肝細胞.用MTT比色法檢測細胞活力的變化,Heochst 33258熒光染色檢測細胞凋亡形態的變化,Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術檢測細胞凋亡率,Western印跡法檢測內質網應激標誌蛋白GRP78和內質網應激相關的凋亡蛋白CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的錶達. 結果 LPS引起肝細胞活力降低、細胞凋亡率明顯增加,併具有量效和時效關繫,LPS誘導GRP78、CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的錶達上調;TG可引起肝細胞活力降低和細胞凋亡增加,併能加重LPS引起的肝細胞損傷;4-PBA明顯抑製LPS引起的肝細胞凋亡增加.結論 內質網應激參與介導瞭LPS引起的肝細胞凋亡,提示內質網應激是LPS誘導肝細胞損傷的重要髮病途徑.
목적 탐토내질망응격재지다당(lipopolysaccharide,LPS)유도적간세포조망중적작용. 방법 간세포계BRL세포배양,용LPS、내질망응격유도제독호라복소(thapsigargin,TG)、내질망응격억제제4-분기정산(4-phenylbutyric acid,4-PBA)분별혹조합처리간세포.용MTT비색법검측세포활력적변화,Heochst 33258형광염색검측세포조망형태적변화,Annexin V-FITC/PI쌍염류식세포술검측세포조망솔,Western인적법검측내질망응격표지단백GRP78화내질망응격상관적조망단백CHOP、caspase-12화격활형caspase-3적표체. 결과 LPS인기간세포활력강저、세포조망솔명현증가,병구유량효화시효관계,LPS유도GRP78、CHOP、caspase-12화격활형caspase-3적표체상조;TG가인기간세포활력강저화세포조망증가,병능가중LPS인기적간세포손상;4-PBA명현억제LPS인기적간세포조망증가.결론 내질망응격삼여개도료LPS인기적간세포조망,제시내질망응격시LPS유도간세포손상적중요발병도경.
