分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2014年
2期
179-185
,共7页
张丹%冯流星%王军%熊金平
張丹%馮流星%王軍%熊金平
장단%풍류성%왕군%웅금평
同位素稀释%蛋白质定量%电感耦合等离子体质谱%转铁蛋白%白蛋白
同位素稀釋%蛋白質定量%電感耦閤等離子體質譜%轉鐵蛋白%白蛋白
동위소희석%단백질정량%전감우합등리자체질보%전철단백%백단백
Isotope dilution%Protein quantification%Inductively coupled plasma mass spectrometry%Transferrin%Albumin
建立了高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用,同时结合柱后同位素稀释法,通过直接测定硫及铁元素,实现蛋白质绝对定量的分析方法.选取分子量不同的4种标准蛋白:转铁蛋白、β乳球蛋白、肌红蛋白和溶菌酶作为混合蛋白,34S或54Fe同位素稀释剂与液相色谱洗脱液经三通混合后,在线进入ICP-MS检测.根据同位素稀释法公式及蛋白中硫、铁的含量计算混合蛋白中每种蛋白的浓度,与天平称量结果一致,对方法进行了验证.将方法应用到人血清转铁蛋白、白蛋白的定量分析,针对两种蛋白含量差别大导致的信号差异,通过改变同位素稀释剂的流速,成功测定了人血清中转铁蛋白、白蛋白的含量.采用34S及54Fe同位素稀释剂分别定量的血清中转铁蛋白浓度为(2.35±0.01) g/L和(2.22±0.13) g/L,结果基本吻合.方法精密度RSD均小于10％,可用于基体样品中含硫蛋白及金属蛋白的定量分析.
建立瞭高效液相色譜(HPLC)與電感耦閤等離子體質譜(ICP-MS)聯用,同時結閤柱後同位素稀釋法,通過直接測定硫及鐵元素,實現蛋白質絕對定量的分析方法.選取分子量不同的4種標準蛋白:轉鐵蛋白、β乳毬蛋白、肌紅蛋白和溶菌酶作為混閤蛋白,34S或54Fe同位素稀釋劑與液相色譜洗脫液經三通混閤後,在線進入ICP-MS檢測.根據同位素稀釋法公式及蛋白中硫、鐵的含量計算混閤蛋白中每種蛋白的濃度,與天平稱量結果一緻,對方法進行瞭驗證.將方法應用到人血清轉鐵蛋白、白蛋白的定量分析,針對兩種蛋白含量差彆大導緻的信號差異,通過改變同位素稀釋劑的流速,成功測定瞭人血清中轉鐵蛋白、白蛋白的含量.採用34S及54Fe同位素稀釋劑分彆定量的血清中轉鐵蛋白濃度為(2.35±0.01) g/L和(2.22±0.13) g/L,結果基本吻閤.方法精密度RSD均小于10％,可用于基體樣品中含硫蛋白及金屬蛋白的定量分析.
건립료고효액상색보(HPLC)여전감우합등리자체질보(ICP-MS)련용,동시결합주후동위소희석법,통과직접측정류급철원소,실현단백질절대정량적분석방법.선취분자량불동적4충표준단백:전철단백、β유구단백、기홍단백화용균매작위혼합단백,34S혹54Fe동위소희석제여액상색보세탈액경삼통혼합후,재선진입ICP-MS검측.근거동위소희석법공식급단백중류、철적함량계산혼합단백중매충단백적농도,여천평칭량결과일치,대방법진행료험증.장방법응용도인혈청전철단백、백단백적정량분석,침대량충단백함량차별대도치적신호차이,통과개변동위소희석제적류속,성공측정료인혈청중전철단백、백단백적함량.채용34S급54Fe동위소희석제분별정량적혈청중전철단백농도위(2.35±0.01) g/L화(2.22±0.13) g/L,결과기본문합.방법정밀도RSD균소우10％,가용우기체양품중함류단백급금속단백적정량분석.
