实用癌症杂志
實用癌癥雜誌
실용암증잡지
THE PRACTICAL JOURNAL OF CANCER
2013年
5期
457-459
,共3页
曾会龙%罗庆丰%刘志礼%詹名花%张志宏%陈文昭%龙新华
曾會龍%囉慶豐%劉誌禮%詹名花%張誌宏%陳文昭%龍新華
증회룡%라경봉%류지례%첨명화%장지굉%진문소%룡신화
脂肪酸合成酶%RNA干扰%骨肉瘤
脂肪痠閤成酶%RNA榦擾%骨肉瘤
지방산합성매%RNA간우%골육류
目的 构建靶向FASN基因的miRNA表达质粒.方法 根据NCBI查询到的FASN cDNA序列设计并合成靶向FASN的寡聚核苷酸序列,连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体中构建重组质粒(分别命名为X197-1、2、3、4).重组质粒与脂质体2000共转染人骨肉瘤U2-OS细胞,倒置荧光显微镜下观察荧光率.采用RT-PCR和Western blot法检测重组质粒对FASN的mRNA及蛋白表达的影响.结果 质粒(X197-1、X197-2)转染U2-OS骨肉瘤细胞后荧光率高于50%.4种质粒均能抑制FASN表达,其中X197-1、X197-4抑制作用显著.结论 靶向FASN基因的miRNA质粒构建成功.
目的 構建靶嚮FASN基因的miRNA錶達質粒.方法 根據NCBI查詢到的FASN cDNA序列設計併閤成靶嚮FASN的寡聚覈苷痠序列,連接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR載體中構建重組質粒(分彆命名為X197-1、2、3、4).重組質粒與脂質體2000共轉染人骨肉瘤U2-OS細胞,倒置熒光顯微鏡下觀察熒光率.採用RT-PCR和Western blot法檢測重組質粒對FASN的mRNA及蛋白錶達的影響.結果 質粒(X197-1、X197-2)轉染U2-OS骨肉瘤細胞後熒光率高于50%.4種質粒均能抑製FASN錶達,其中X197-1、X197-4抑製作用顯著.結論 靶嚮FASN基因的miRNA質粒構建成功.
목적 구건파향FASN기인적miRNA표체질립.방법 근거NCBI사순도적FASN cDNA서렬설계병합성파향FASN적과취핵감산서렬,련접도pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR재체중구건중조질립(분별명명위X197-1、2、3、4).중조질립여지질체2000공전염인골육류U2-OS세포,도치형광현미경하관찰형광솔.채용RT-PCR화Western blot법검측중조질립대FASN적mRNA급단백표체적영향.결과 질립(X197-1、X197-2)전염U2-OS골육류세포후형광솔고우50%.4충질립균능억제FASN표체,기중X197-1、X197-4억제작용현저.결론 파향FASN기인적miRNA질립구건성공.
