中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
10期
1395-1400
,共6页
黄琼%越茂松%季秋虹%王进京%季煜华
黃瓊%越茂鬆%季鞦虹%王進京%季煜華
황경%월무송%계추홍%왕진경%계욱화
曲古抑菌素A%SH-SY5Y细胞%缺氧/缺糖损伤%氧化应激%活性氧%线粒体膜电位
麯古抑菌素A%SH-SY5Y細胞%缺氧/缺糖損傷%氧化應激%活性氧%線粒體膜電位
곡고억균소A%SH-SY5Y세포%결양/결당손상%양화응격%활성양%선립체막전위
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖 (oxygen-glucose deprivation,OGD) 损伤的保护作用及其可能机制.方法 采用化学方法建立SH-SY5Y细胞不同时间(1、2、4、6和8 h)持续性OGD损伤模型,MTT法检测细胞活性,以评估持续性OGD损伤对SH-SY5Y细胞的损伤程度.继而观察TSA(10、20、40、80 nmol·L-1)对OGD诱导的神经元损伤的影响,实验指标如下:倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT检测TSA对细胞活性的影响,Propidium iodide(PI)和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡与坏死情况,荧光显微镜检测各组细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和线粒体膜电位(mitochondrion membrane potential,MMP)的变化.结果 OGD损伤2 h,模型组的细胞活性和MMP水平较对照组明显降低,并随OGD时间的延长而变化越明显.而ROS含量较对照组明显升高,Hoechst 和PI双染检测也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,并随OGD时间的延长,凋亡和坏死细胞的数量增加.与模型组相比,40 nmol·L-1 TSA能明显提高OGD诱导的神经元的活性,降低细胞内ROS含量,以及提高MMP水平.结论 TSA对OGD诱导SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤具有明显的保护作用,其保护机制可能与降低细胞内ROS水平及维持MMP的高能状态有关.
目的 探討組蛋白去乙酰化酶抑製劑麯古抑菌素A(trichostatin A,TSA)對人神經母細胞瘤細胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖 (oxygen-glucose deprivation,OGD) 損傷的保護作用及其可能機製.方法 採用化學方法建立SH-SY5Y細胞不同時間(1、2、4、6和8 h)持續性OGD損傷模型,MTT法檢測細胞活性,以評估持續性OGD損傷對SH-SY5Y細胞的損傷程度.繼而觀察TSA(10、20、40、80 nmol·L-1)對OGD誘導的神經元損傷的影響,實驗指標如下:倒置顯微鏡觀察細胞形態學變化,MTT檢測TSA對細胞活性的影響,Propidium iodide(PI)和Hoechst 33258染色檢測細胞凋亡與壞死情況,熒光顯微鏡檢測各組細胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和線粒體膜電位(mitochondrion membrane potential,MMP)的變化.結果 OGD損傷2 h,模型組的細胞活性和MMP水平較對照組明顯降低,併隨OGD時間的延長而變化越明顯.而ROS含量較對照組明顯升高,Hoechst 和PI雙染檢測也髮現染色質凝聚,覈碎裂,凋亡小體產生,併隨OGD時間的延長,凋亡和壞死細胞的數量增加.與模型組相比,40 nmol·L-1 TSA能明顯提高OGD誘導的神經元的活性,降低細胞內ROS含量,以及提高MMP水平.結論 TSA對OGD誘導SH-SY5Y細胞缺氧/缺糖損傷具有明顯的保護作用,其保護機製可能與降低細胞內ROS水平及維持MMP的高能狀態有關.
목적 탐토조단백거을선화매억제제곡고억균소A(trichostatin A,TSA)대인신경모세포류세포(SH-SY5Y)결양/결당 (oxygen-glucose deprivation,OGD) 손상적보호작용급기가능궤제.방법 채용화학방법건립SH-SY5Y세포불동시간(1、2、4、6화8 h)지속성OGD손상모형,MTT법검측세포활성,이평고지속성OGD손상대SH-SY5Y세포적손상정도.계이관찰TSA(10、20、40、80 nmol·L-1)대OGD유도적신경원손상적영향,실험지표여하:도치현미경관찰세포형태학변화,MTT검측TSA대세포활성적영향,Propidium iodide(PI)화Hoechst 33258염색검측세포조망여배사정황,형광현미경검측각조세포내활성양(reactive oxygen species,ROS)함량화선립체막전위(mitochondrion membrane potential,MMP)적변화.결과 OGD손상2 h,모형조적세포활성화MMP수평교대조조명현강저,병수OGD시간적연장이변화월명현.이ROS함량교대조조명현승고,Hoechst 화PI쌍염검측야발현염색질응취,핵쇄렬,조망소체산생,병수OGD시간적연장,조망화배사세포적수량증가.여모형조상비,40 nmol·L-1 TSA능명현제고OGD유도적신경원적활성,강저세포내ROS함량,이급제고MMP수평.결론 TSA대OGD유도SH-SY5Y세포결양/결당손상구유명현적보호작용,기보호궤제가능여강저세포내ROS수평급유지MMP적고능상태유관.
