浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
4期
431-436
,共6页
三尖杉酯碱/药理学%白血病,早幼粒细胞,急性/药物疗法%细胞凋亡/药物作用%NB4细胞%Mcl-1
三尖杉酯堿/藥理學%白血病,早幼粒細胞,急性/藥物療法%細胞凋亡/藥物作用%NB4細胞%Mcl-1
삼첨삼지감/약이학%백혈병,조유립세포,급성/약물요법%세포조망/약물작용%NB4세포%Mcl-1
Harringtonine/pharmacology%Leukemia,promyelocytic,acute/drug therapy%Apoptosis/drug effects%NB4 cells%Mcl-1
目的:考察三尖杉酯碱(HT)对人急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用,并探讨其杀伤白血病细胞的作用机制.方法:采用台盼兰染色法,细胞计数,考察HT对NB4细胞的生长抑制作用和细胞毒性作用;采用AO-EB荧光染色法和细胞形态学观察,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用PI染色的流式细胞术,考察HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;采用Western Blotting技术,考察HT对NB4细胞凋亡相关蛋白的影响;采用siRNA干扰技术,沉默目的蛋白证明推论;提取APL患者血液样本,验证HT的凋亡诱导作用及作用机制.结果:HT能够呈剂量依赖和时间依赖地抑制NB4细胞生长并杀伤NB4细胞,HT处理72h后GI50为(32.0±2.5) nmol/L; HT能够呈现剂量依赖和时间依赖的诱导NB4细胞凋亡,HT处理6h后其诱导凋亡百分率为66%;HT诱导NB4细胞凋亡,引起PARP蛋白裂解,并不下调Bcl-2,不影响Bax和Bak的表达,但显著下调Mcl-1蛋白水平;siRNA沉默Mcl-1的蛋白表达可以显著提高HT对NB4细胞的凋亡诱导作用;HT诱导APL患者白血病样本细胞凋亡,并下调Mcl-1蛋白.结论:HT通过抑制细胞生长和诱导细胞凋亡杀伤NB4细胞,HT可能通过下调Mcl-1蛋白发挥诱导NB4细胞凋亡的抗白血病作用.
目的:攷察三尖杉酯堿(HT)對人急性早幼粒白血病(APL)細胞株NB4細胞的生長抑製作用和凋亡誘導作用,併探討其殺傷白血病細胞的作用機製.方法:採用檯盼蘭染色法,細胞計數,攷察HT對NB4細胞的生長抑製作用和細胞毒性作用;採用AO-EB熒光染色法和細胞形態學觀察,攷察HT對NB4細胞的凋亡誘導作用;採用PI染色的流式細胞術,攷察HT對NB4細胞的凋亡誘導作用;採用Western Blotting技術,攷察HT對NB4細胞凋亡相關蛋白的影響;採用siRNA榦擾技術,沉默目的蛋白證明推論;提取APL患者血液樣本,驗證HT的凋亡誘導作用及作用機製.結果:HT能夠呈劑量依賴和時間依賴地抑製NB4細胞生長併殺傷NB4細胞,HT處理72h後GI50為(32.0±2.5) nmol/L; HT能夠呈現劑量依賴和時間依賴的誘導NB4細胞凋亡,HT處理6h後其誘導凋亡百分率為66%;HT誘導NB4細胞凋亡,引起PARP蛋白裂解,併不下調Bcl-2,不影響Bax和Bak的錶達,但顯著下調Mcl-1蛋白水平;siRNA沉默Mcl-1的蛋白錶達可以顯著提高HT對NB4細胞的凋亡誘導作用;HT誘導APL患者白血病樣本細胞凋亡,併下調Mcl-1蛋白.結論:HT通過抑製細胞生長和誘導細胞凋亡殺傷NB4細胞,HT可能通過下調Mcl-1蛋白髮揮誘導NB4細胞凋亡的抗白血病作用.
목적:고찰삼첨삼지감(HT)대인급성조유립백혈병(APL)세포주NB4세포적생장억제작용화조망유도작용,병탐토기살상백혈병세포적작용궤제.방법:채용태반란염색법,세포계수,고찰HT대NB4세포적생장억제작용화세포독성작용;채용AO-EB형광염색법화세포형태학관찰,고찰HT대NB4세포적조망유도작용;채용PI염색적류식세포술,고찰HT대NB4세포적조망유도작용;채용Western Blotting기술,고찰HT대NB4세포조망상관단백적영향;채용siRNA간우기술,침묵목적단백증명추론;제취APL환자혈액양본,험증HT적조망유도작용급작용궤제.결과:HT능구정제량의뢰화시간의뢰지억제NB4세포생장병살상NB4세포,HT처리72h후GI50위(32.0±2.5) nmol/L; HT능구정현제량의뢰화시간의뢰적유도NB4세포조망,HT처리6h후기유도조망백분솔위66%;HT유도NB4세포조망,인기PARP단백렬해,병불하조Bcl-2,불영향Bax화Bak적표체,단현저하조Mcl-1단백수평;siRNA침묵Mcl-1적단백표체가이현저제고HT대NB4세포적조망유도작용;HT유도APL환자백혈병양본세포조망,병하조Mcl-1단백.결론:HT통과억제세포생장화유도세포조망살상NB4세포,HT가능통과하조Mcl-1단백발휘유도NB4세포조망적항백혈병작용.