微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2014年
2期
7-11
,共5页
李菁华%史红艳%韩放%逯茵茵%徐国全%于丽%孙延波
李菁華%史紅豔%韓放%逯茵茵%徐國全%于麗%孫延波
리정화%사홍염%한방%록인인%서국전%우려%손연파
人乳头瘤病毒16型%原核表达%多克隆抗体
人乳頭瘤病毒16型%原覈錶達%多剋隆抗體
인유두류병독16형%원핵표체%다극륭항체
目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16) E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性.方法 人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因.将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白.纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价.结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致.表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符.以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000.结论 成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性.
目的 構建人乳頭瘤病毒16型(HPV16) E7基因密碼子優化後的原覈錶達繫統,通過特異性抗體製備評價E7融閤蛋白的免疫原性.方法 人工閤成優化後的HPV16 E7基因,利用特異引物擴增HPV16 E7基因.將E7基因連接至原覈錶達載體構建重組錶達質粒pMAl-c2X-E7,轉化至感受態細胞DE3後,經IPTG誘導,SDS-PAGE分析錶達產物E7融閤蛋白.純化後的E7融閤蛋白免疫動物,採用ELISA檢測動物血清效價.結果 E7基因PCR產物的測序結果與優化後的目的基因序列比對一緻.錶達的E7融閤蛋白經SDS-PAGE分析錶明:在相對分子質量50 000處有特異性錶達帶,與預期相符.以E7融閤蛋白製備的多剋隆抗體其血清效價可達1∶64 000.結論 成功構建的重組錶達質粒pMAl-c2X-E7可有效錶達MBP-E7融閤蛋白,E7融閤蛋白具有良好的免疫原性.
목적 구건인유두류병독16형(HPV16) E7기인밀마자우화후적원핵표체계통,통과특이성항체제비평개E7융합단백적면역원성.방법 인공합성우화후적HPV16 E7기인,이용특이인물확증HPV16 E7기인.장E7기인련접지원핵표체재체구건중조표체질립pMAl-c2X-E7,전화지감수태세포DE3후,경IPTG유도,SDS-PAGE분석표체산물E7융합단백.순화후적E7융합단백면역동물,채용ELISA검측동물혈청효개.결과 E7기인PCR산물적측서결과여우화후적목적기인서렬비대일치.표체적E7융합단백경SDS-PAGE분석표명:재상대분자질량50 000처유특이성표체대,여예기상부.이E7융합단백제비적다극륭항체기혈청효개가체1∶64 000.결론 성공구건적중조표체질립pMAl-c2X-E7가유효표체MBP-E7융합단백,E7융합단백구유량호적면역원성.
