集美大学学报（自然科学版）
集美大學學報（自然科學版）
집미대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF JIMEI UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2014年
3期
161-167
,共7页
陈紫瑩%王浩华%王凯武%刘贤德%王志勇%蔡明夷
陳紫瑩%王浩華%王凱武%劉賢德%王誌勇%蔡明夷
진자영%왕호화%왕개무%류현덕%왕지용%채명이
黄姑鱼%染色体%核仁组织区域
黃姑魚%染色體%覈仁組織區域
황고어%염색체%핵인조직구역
研究了DPI染法显示黄姑鱼NOR的条件,并比较了DPI染法与银染法差别显示的位置、数目和直径.综合研究结果,DPI染法显示黄姑鱼NOR的程序可以归纳为:制片在60℃恒温箱中老化3～6h,接着在体积分数为80％的甲酰胺/2×SSC中65℃处理4min后,再用系列乙醇脱水,放在60℃下烘片5～10 min,然后滴加含有1μg/mL碘化丙啶(PI)的封片剂,盖上盖玻片,用指甲油封片.其中,热甲酰胺处理和PI染色是必须步骤;制片的老化和烘片虽非必须步骤,但可以提高差别显示的对比度.由DPI染法和银染法的对比试验结果显示,两种方法差别显示区域的位置一致,数目分布相当,直径没有显著性差异.可见,DPI染法可以替代银染法用于显示黄姑鱼间期核和中期染色体的NOR.由数目比较试验结果显示,DPI染法组仅个别间期核(0.81％)观察到3个NOR,而银染组观察到3个以上的间期核达3.51％.这表明,DPI染法比银染法有更高的特异性,更适合黄姑鱼群体NOR多态性研究.此外,DPI染法还可与FISH联用,同时定位NOR和其他基因位点.
研究瞭DPI染法顯示黃姑魚NOR的條件,併比較瞭DPI染法與銀染法差彆顯示的位置、數目和直徑.綜閤研究結果,DPI染法顯示黃姑魚NOR的程序可以歸納為:製片在60℃恆溫箱中老化3～6h,接著在體積分數為80％的甲酰胺/2×SSC中65℃處理4min後,再用繫列乙醇脫水,放在60℃下烘片5～10 min,然後滴加含有1μg/mL碘化丙啶(PI)的封片劑,蓋上蓋玻片,用指甲油封片.其中,熱甲酰胺處理和PI染色是必鬚步驟;製片的老化和烘片雖非必鬚步驟,但可以提高差彆顯示的對比度.由DPI染法和銀染法的對比試驗結果顯示,兩種方法差彆顯示區域的位置一緻,數目分佈相噹,直徑沒有顯著性差異.可見,DPI染法可以替代銀染法用于顯示黃姑魚間期覈和中期染色體的NOR.由數目比較試驗結果顯示,DPI染法組僅箇彆間期覈(0.81％)觀察到3箇NOR,而銀染組觀察到3箇以上的間期覈達3.51％.這錶明,DPI染法比銀染法有更高的特異性,更適閤黃姑魚群體NOR多態性研究.此外,DPI染法還可與FISH聯用,同時定位NOR和其他基因位點.
연구료DPI염법현시황고어NOR적조건,병비교료DPI염법여은염법차별현시적위치、수목화직경.종합연구결과,DPI염법현시황고어NOR적정서가이귀납위:제편재60℃항온상중노화3～6h,접착재체적분수위80％적갑선알/2×SSC중65℃처리4min후,재용계렬을순탈수,방재60℃하홍편5～10 min,연후적가함유1μg/mL전화병정(PI)적봉편제,개상개파편,용지갑유봉편.기중,열갑선알처리화PI염색시필수보취;제편적노화화홍편수비필수보취,단가이제고차별현시적대비도.유DPI염법화은염법적대비시험결과현시,량충방법차별현시구역적위치일치,수목분포상당,직경몰유현저성차이.가견,DPI염법가이체대은염법용우현시황고어간기핵화중기염색체적NOR.유수목비교시험결과현시,DPI염법조부개별간기핵(0.81％)관찰도3개NOR,이은염조관찰도3개이상적간기핵체3.51％.저표명,DPI염법비은염법유경고적특이성,경괄합황고어군체NOR다태성연구.차외,DPI염법환가여FISH련용,동시정위NOR화기타기인위점.
