CAJ | 학술논문

目前已经找到一种由雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)细胞培养法生产雷公藤甲素和生物碱的方法,但是这种方法生产的次生代谢物产量较低,因此本研究利用紫外光(UV-B)辐照和超声波处理对雷公藤悬浮培养体系中萜类次生代谢物的含量进行了检测分析.在雷公藤悬浮细胞的不同培养时期,利用不同时长的UV-B辐照和超声波分别处理的雷公藤悬浮细胞和培养体系,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对悬浮细胞和培养液中雷公藤内酯醇、吉碱和次碱的含量进行测定.结果表明,利用UV-B辐照和超声波处理均可以显著提高雷公藤悬浮培养体系中悬浮细胞生长量及其次生代谢物的含量.紫外辐照及超声波处理均可使雷公藤悬浮细胞的生长量比对照提高1～2倍.在雷公藤悬浮细胞生长周期的第13天用UV-B辐照90 min,雷公藤悬浮细胞中内酯醇、吉碱和次碱产物含量达到最大,分别为5.185、39.747和42.189 μg/L;超声波处理40 s时,次生代谢物含量达到最大,分别为5.185、40.080和45.472 μg/L,与对照相比提高1～3倍.另外超声波处理对雷公藤悬浮细胞中次生代谢物释放分泌入细胞培养液中有一定程度的促进作用,通过对雷公藤悬浮细胞培养液中次生代谢物含量的检测发现,在处理时长分别为40 s时,内酯醇、吉碱和次碱的转化率分别达到93.7％、86.6％和88.1％,与对照相比含量提高1～3倍.本研究为解决雷公藤野生资源短缺,利用雷公藤悬浮细胞培养生产雷公藤内酯醇、吉碱和次碱提供基础资料.
목전이경조도일충유뢰공등(Tripterygium wilfordii Hook.f.)세포배양법생산뢰공등갑소화생물감적방법,단시저충방법생산적차생대사물산량교저,인차본연구이용자외광(UV-B)복조화초성파처리대뢰공등현부배양체계중첩류차생대사물적함량진행료검측분석.재뢰공등현부세포적불동배양시기,이용불동시장적UV-B복조화초성파분별처리적뢰공등현부세포화배양체계,채용고효액상색보법(high performance liquid chromatography,HPLC)대현부세포화배양액중뢰공등내지순、길감화차감적함량진행측정.결과표명,이용UV-B복조화초성파처리균가이현저제고뢰공등현부배양체계중현부세포생장량급기차생대사물적함량.자외복조급초성파처리균가사뢰공등현부세포적생장량비대조제고1～2배.재뢰공등현부세포생장주기적제13천용UV-B복조90 min,뢰공등현부세포중내지순、길감화차감산물함량체도최대,분별위5.185、39.747화42.189 μg/L;초성파처리40 s시,차생대사물함량체도최대,분별위5.185、40.080화45.472 μg/L,여대조상비제고1～3배.령외초성파처리대뢰공등현부세포중차생대사물석방분비입세포배양액중유일정정도적촉진작용,통과대뢰공등현부세포배양액중차생대사물함량적검측발현,재처리시장분별위40 s시,내지순、길감화차감적전화솔분별체도93.7％、86.6％화88.1％,여대조상비함량제고1～3배.본연구위해결뢰공등야생자원단결,이용뢰공등현부세포배양생산뢰공등내지순、길감화차감제공기출자료.