农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
9期
1045-1051
,共7页
张龙雨%赵新亮%刘红占%宋瑜龙%张改生
張龍雨%趙新亮%劉紅佔%宋瑜龍%張改生
장룡우%조신량%류홍점%송유룡%장개생
小麦%雄性不育%丙酮酸脱氢酶激酶%增殖细胞核抗原%细胞核分裂
小麥%雄性不育%丙酮痠脫氫酶激酶%增殖細胞覈抗原%細胞覈分裂
소맥%웅성불육%병동산탈경매격매%증식세포핵항원%세포핵분렬
Wheat%Male sterility%Pyruvate dehydrogenase kinase%Proliferating cell nuclear antigen%Cell nucleus division
目前对于植物体中丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase,PDK)的研究,除了解其参与调节线粒体丙酮酸脱氢酶复合体的活性外,对其他调控机制尚不清楚.本实验室的前期研究结果表明,小麦丙酮酸脱氢酶激酶(TaPDK)在小麦(Triticum aestivum)遗传型不育系和相应的生理型不育系中的表达是不一致的.为进一步研究SQ-1诱导的小麦花药败育过程中调控TaPDK的作用因子,本研究采用酵母双杂交方法筛选小麦TaPDK的互作蛋白.将含有pGBKT7-PDK质粒的酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株Y2HGold与文库酵母菌株Y187共同融合培养,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp平板上划线培养,挑选直径大于2mm的克隆,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/AbA/X-α-Gal平板上划线,筛选蓝色克隆.其中,筛选得到一个新的结合蛋白,该蛋白被命名为增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,TaPCNA).将花粉细胞的核复制分裂与TaPCNA的定量表达结合分析发现,TaPCNA在不育系与可育系的叶片中几乎不表达,但在花粉发育的各个时期中呈现高表达,尤其在生理型不育系花药中的表达量显著高于遗传型不育系和可育系,这表明在生理型不育系中,TaPCNA与小孢子的细胞周期发育更加密切相关.这为进一步研究生理型不育小孢子异常发育的细胞周期提供了基础资料.
目前對于植物體中丙酮痠脫氫酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase,PDK)的研究,除瞭解其參與調節線粒體丙酮痠脫氫酶複閤體的活性外,對其他調控機製尚不清楚.本實驗室的前期研究結果錶明,小麥丙酮痠脫氫酶激酶(TaPDK)在小麥(Triticum aestivum)遺傳型不育繫和相應的生理型不育繫中的錶達是不一緻的.為進一步研究SQ-1誘導的小麥花藥敗育過程中調控TaPDK的作用因子,本研究採用酵母雙雜交方法篩選小麥TaPDK的互作蛋白.將含有pGBKT7-PDK質粒的酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株Y2HGold與文庫酵母菌株Y187共同融閤培養,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp平闆上劃線培養,挑選直徑大于2mm的剋隆,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/AbA/X-α-Gal平闆上劃線,篩選藍色剋隆.其中,篩選得到一箇新的結閤蛋白,該蛋白被命名為增殖細胞覈抗原(proliferating cell nuclear antigen,TaPCNA).將花粉細胞的覈複製分裂與TaPCNA的定量錶達結閤分析髮現,TaPCNA在不育繫與可育繫的葉片中幾乎不錶達,但在花粉髮育的各箇時期中呈現高錶達,尤其在生理型不育繫花藥中的錶達量顯著高于遺傳型不育繫和可育繫,這錶明在生理型不育繫中,TaPCNA與小孢子的細胞週期髮育更加密切相關.這為進一步研究生理型不育小孢子異常髮育的細胞週期提供瞭基礎資料.
목전대우식물체중병동산탈경매격매(pyruvate dehydrogenase kinase,PDK)적연구,제료해기삼여조절선립체병동산탈경매복합체적활성외,대기타조공궤제상불청초.본실험실적전기연구결과표명,소맥병동산탈경매격매(TaPDK)재소맥(Triticum aestivum)유전형불육계화상응적생리형불육계중적표체시불일치적.위진일보연구SQ-1유도적소맥화약패육과정중조공TaPDK적작용인자,본연구채용효모쌍잡교방법사선소맥TaPDK적호작단백.장함유pGBKT7-PDK질립적효모(Saccharomyces cerevisiae)균주Y2HGold여문고효모균주Y187공동융합배양,재SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp평판상화선배양,도선직경대우2mm적극륭,재SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/AbA/X-α-Gal평판상화선,사선람색극륭.기중,사선득도일개신적결합단백,해단백피명명위증식세포핵항원(proliferating cell nuclear antigen,TaPCNA).장화분세포적핵복제분렬여TaPCNA적정량표체결합분석발현,TaPCNA재불육계여가육계적협편중궤호불표체,단재화분발육적각개시기중정현고표체,우기재생리형불육계화약중적표체량현저고우유전형불육계화가육계,저표명재생리형불육계중,TaPCNA여소포자적세포주기발육경가밀절상관.저위진일보연구생리형불육소포자이상발육적세포주기제공료기출자료.