中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2013年
18期
19-22
,共4页
康喜龙%王静%潘志明%杨芸%赵雯%焦新安
康喜龍%王靜%潘誌明%楊蕓%趙雯%焦新安
강희룡%왕정%반지명%양예%조문%초신안
密码子优化%白细胞介素-17%杆状病毒%真核表达
密碼子優化%白細胞介素-17%桿狀病毒%真覈錶達
밀마자우화%백세포개소-17%간상병독%진핵표체
为了获得具有良好生物学活性且具有较高表达量的鸡白细胞介素-17(ChIL-17),本研究在前期研究工作基础上,将ChIL-17的编码基因按照真核细胞(昆虫细胞)偏爱的密码子进行优化改造,经全基因合成后插入到转座载体pFastBacTM Ⅰ中,构建重组转移质粒pfast-mod.ChIL-17并转化DH10Bac感受态细胞.通过位点特异性转座将mod.ChIL-17基因整合到穿梭质粒Bacmid中,获得重组穿梭质粒Bacmid-mod.ChIL-17.应用脂质体将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-mod.ChIL-17.重组病毒传代扩增感染Sf9细胞,通过间接免疫荧光检测目的蛋白的表达.结果表明,经过优化的ChIL-17在杆状病毒系统中获得表达.
為瞭穫得具有良好生物學活性且具有較高錶達量的鷄白細胞介素-17(ChIL-17),本研究在前期研究工作基礎上,將ChIL-17的編碼基因按照真覈細胞(昆蟲細胞)偏愛的密碼子進行優化改造,經全基因閤成後插入到轉座載體pFastBacTM Ⅰ中,構建重組轉移質粒pfast-mod.ChIL-17併轉化DH10Bac感受態細胞.通過位點特異性轉座將mod.ChIL-17基因整閤到穿梭質粒Bacmid中,穫得重組穿梭質粒Bacmid-mod.ChIL-17.應用脂質體將重組穿梭質粒轉染Sf9昆蟲細胞,穫得重組桿狀病毒rBac-mod.ChIL-17.重組病毒傳代擴增感染Sf9細胞,通過間接免疫熒光檢測目的蛋白的錶達.結果錶明,經過優化的ChIL-17在桿狀病毒繫統中穫得錶達.
위료획득구유량호생물학활성차구유교고표체량적계백세포개소-17(ChIL-17),본연구재전기연구공작기출상,장ChIL-17적편마기인안조진핵세포(곤충세포)편애적밀마자진행우화개조,경전기인합성후삽입도전좌재체pFastBacTM Ⅰ중,구건중조전이질립pfast-mod.ChIL-17병전화DH10Bac감수태세포.통과위점특이성전좌장mod.ChIL-17기인정합도천사질립Bacmid중,획득중조천사질립Bacmid-mod.ChIL-17.응용지질체장중조천사질립전염Sf9곤충세포,획득중조간상병독rBac-mod.ChIL-17.중조병독전대확증감염Sf9세포,통과간접면역형광검측목적단백적표체.결과표명,경과우화적ChIL-17재간상병독계통중획득표체.
