中国糖尿病杂志
中國糖尿病雜誌
중국당뇨병잡지
CHINESE JOURNAL OF DIABETES
2013年
9期
836-840
,共5页
血清淀粉样蛋白A%RNA干扰%人肾小球系膜细胞%波动性高血糖
血清澱粉樣蛋白A%RNA榦擾%人腎小毬繫膜細胞%波動性高血糖
혈청정분양단백A%RNA간우%인신소구계막세포%파동성고혈당
Serum amyloid A (SAA)%RNA interference%Human mesangial cells (HMCs)%Fluctuated high glucose
目的 研究SAA-siRNA沉默对波动性高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)炎症反应及细胞外基质(ECM)的影响,探讨波动性高糖与糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)的关系及血清淀粉样蛋白A(SAA)在CKD发生发展中的作用. 方法 传代培养5~9代的HMCs,同步化后分6组进行实验.荧光倒置显微镜观察siRNA转染效率;real-time RT-PCR技术检测SAA及TNF-α的mRNA表达;Western Blot印迹检测细胞内SAA蛋白的表达;ELISA法检测细胞上清液中SAA、纤连蛋白(FN)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况. 结果 分组培养48 h后,高血糖(HG)组SAA、FN及TNF-α的表达较对照(NC)组升高(P<0.05),波动性高血糖(FG)组较HG组表达升高(P<0.05);波动性高血糖+SAA-siRNA(FG+ SAA-siRNA)组SAA、FN及TNF-α表达较FG组降低(P<0.05). 结论 波动性高血糖可引起HMCs更高水平SAA、FN及TNF-α的表达;通过SAA-siRNA沉默SAA表达,可减少波动性高血糖刺激下HMCs的FN、TNF-α分泌,减少肾小球ECM积聚和炎症反应,为CKD防治提供新的实验依据.
目的 研究SAA-siRNA沉默對波動性高糖培養下人腎小毬繫膜細胞(HMCs)炎癥反應及細胞外基質(ECM)的影響,探討波動性高糖與糖尿病慢性腎髒疾病(CKD)的關繫及血清澱粉樣蛋白A(SAA)在CKD髮生髮展中的作用. 方法 傳代培養5~9代的HMCs,同步化後分6組進行實驗.熒光倒置顯微鏡觀察siRNA轉染效率;real-time RT-PCR技術檢測SAA及TNF-α的mRNA錶達;Western Blot印跡檢測細胞內SAA蛋白的錶達;ELISA法檢測細胞上清液中SAA、纖連蛋白(FN)及腫瘤壞死因子α(TNF-α)的錶達情況. 結果 分組培養48 h後,高血糖(HG)組SAA、FN及TNF-α的錶達較對照(NC)組升高(P<0.05),波動性高血糖(FG)組較HG組錶達升高(P<0.05);波動性高血糖+SAA-siRNA(FG+ SAA-siRNA)組SAA、FN及TNF-α錶達較FG組降低(P<0.05). 結論 波動性高血糖可引起HMCs更高水平SAA、FN及TNF-α的錶達;通過SAA-siRNA沉默SAA錶達,可減少波動性高血糖刺激下HMCs的FN、TNF-α分泌,減少腎小毬ECM積聚和炎癥反應,為CKD防治提供新的實驗依據.
목적 연구SAA-siRNA침묵대파동성고당배양하인신소구계막세포(HMCs)염증반응급세포외기질(ECM)적영향,탐토파동성고당여당뇨병만성신장질병(CKD)적관계급혈청정분양단백A(SAA)재CKD발생발전중적작용. 방법 전대배양5~9대적HMCs,동보화후분6조진행실험.형광도치현미경관찰siRNA전염효솔;real-time RT-PCR기술검측SAA급TNF-α적mRNA표체;Western Blot인적검측세포내SAA단백적표체;ELISA법검측세포상청액중SAA、섬련단백(FN)급종류배사인자α(TNF-α)적표체정황. 결과 분조배양48 h후,고혈당(HG)조SAA、FN급TNF-α적표체교대조(NC)조승고(P<0.05),파동성고혈당(FG)조교HG조표체승고(P<0.05);파동성고혈당+SAA-siRNA(FG+ SAA-siRNA)조SAA、FN급TNF-α표체교FG조강저(P<0.05). 결론 파동성고혈당가인기HMCs경고수평SAA、FN급TNF-α적표체;통과SAA-siRNA침묵SAA표체,가감소파동성고혈당자격하HMCs적FN、TNF-α분비,감소신소구ECM적취화염증반응,위CKD방치제공신적실험의거.